Il polisaccaride della clorella (PFC), in quanto polisaccaride naturale, ha attirato molta attenzione da parte degli studiosi negli ultimi anni grazie ai suoi vantaggi di bassa tossicità, bassi effetti collaterali ed effetti ad ampio spettro. Le sue funzioni di abbassamento dei lipidi nel sangue, antitumorali, antinfiammatorie, anti-Parkinson, anti-invecchiamento, ecc. sono state preliminarmente validate con esperimenti in vitro e in vivo. Tuttavia, esiste ancora una lacuna nella ricerca sul PFC come modulatore immunitario umano.

Le cellule dendritiche (DC) sono le cellule presentanti l'antigene specializzate più potenti nel corpo umano. Il numero di DC nel corpo umano è estremamente piccolo e viene comunemente utilizzato un modello di induzione in vitro mediato da citochine, vale a dire DC derivate da cellule mononucleari del sangue periferico umano (moDC). Il modello di DC indotta in vitro è stato segnalato per la prima volta nel 1992, che è il sistema di coltura tradizionale per le DC. In genere richiede una coltivazione di 6-7 giorni. Le cellule del midollo osseo del topo possono essere coltivate con il fattore stimolante le colonie di granulociti macrofagi (GM-CSF) e interleuchina (IL) -4 per ottenere DC immature (gruppo PBS). Le citochine vengono aggiunte come stimoli maturi e coltivate per 1-2 giorni per ottenere DC mature. Un altro studio ha riportato che cellule CD14+ umane purificate sono state coltivate con interferone – β (IFN – β) o IL-4 per 5 giorni, e poi coltivate con fattore di necrosi tumorale-a (TNF-a) per 2 giorni per ottenere DC con elevata espressione di CD11c e CD83, che hanno una maggiore capacità di promuovere la proliferazione di cellule T allogeniche CD4+ e cellule T CD8+. Numerosi polisaccaridi provenienti da fonti naturali hanno un'eccellente attività immunomodulante, come i polisaccaridi dei funghi shiitake, dei funghi branchiali, dei funghi Yunzhi e dei Poria cocco, che sono stati applicati nella pratica clinica. Possono migliorare efficacemente la funzione immunitaria del corpo, potenziare l'immunità e servire come terapie adiuvanti per il trattamento antitumorale. Tuttavia, ci sono pochi rapporti di ricerca sul PFC come modulatore immunitario umano. Pertanto, questo articolo conduce una ricerca preliminare sul ruolo e sui meccanismi correlati del PFC nel promuovere la maturazione delle moDC, al fine di valutare il potenziale del PFC come modulatore immunitario naturale.

A causa della proporzione estremamente bassa di DC nei tessuti umani e dell'elevata conservazione interspecie tra DC di topo e DC umane, al fine di risolvere le difficoltà di ricerca causate dalla bassa produzione di DC, modelli di induzione in vitro di DC derivate da cellule mononucleate del sangue periferico umano sono stati studiati, che possono ottenere DC con buona immunogenicità in un breve periodo di tempo. Pertanto, questo studio ha utilizzato il metodo tradizionale per indurre le DC umane in vitro: co-coltivare rhGM CSF e rhIL-4 in vitro, cambiando il mezzo a giorni alterni e ottenendo DC immature il 5° giorno; Il 6° giorno, volumi uguali di PBS, PFC e LPS sono stati aggiunti in base al raggruppamento e coltivati ​​per 24 ore come protocollo di coltura per indurre DC derivate da cellule mononucleate del sangue periferico umano.

I polisaccaridi derivati ​​da prodotti naturali presentano i vantaggi di una bassa tossicità e di un basso costo come immunostimolanti. Dopo esperimenti preliminari, il nostro gruppo di ricerca ha scoperto che il PFC potenzia significativamente il marcatore maturo CD83 sulla superficie delle cellule DC derivate da cellule mononucleari del sangue periferico umano indotte in vitro. I risultati della citometria a flusso hanno mostrato che l'intervento del PFC ad una concentrazione di 10 μ g/mL per 24 ore ha prodotto un picco di espressione del marcatore maturo CD83 sulla superficie delle DC, indicando che le DC sono entrate in uno stato maturo. Pertanto, il nostro gruppo di ricerca ha determinato il piano di induzione e intervento in vitro. CD83 è un importante biomarcatore maturo sulla superficie delle DC, mentre CD86 funge da importante molecola costimolatoria sulla superficie delle DC, agendo come secondo segnale per l'attivazione delle cellule T. L'espressione potenziata di due biomarcatori CD83 e CD86 indica che il PFC promuove la maturazione delle DC derivate da cellule mononucleari del sangue periferico umano, suggerendo che il PFC può simultaneamente aumentare il livello di secrezione di citochine sulla superficie delle DC. Pertanto, questo studio ha valutato i livelli di citochine IL-6, TNF-a e IL-10 secrete dalle DC utilizzando ELISA. L'IL-10 è strettamente correlata alla tolleranza immunitaria delle DC e le DC con tolleranza immunitaria sono comunemente usate nel trattamento dei tumori, fornendo potenziali idee terapeutiche per la tolleranza immunitaria nel trapianto di organi; La famiglia 1L-6 svolge un ruolo importante nell'immunità innata e adattativa, nell'ematopoiesi e negli effetti antinfiammatori; Esistono studi che indicano che IL-6 e TGF β partecipano congiuntamente alla differenziazione delle cellule Th17; Quando l’organismo viene invaso da un virus, il TNF-a prodotto dalle DC in risposta all’attivazione del virus agisce come fattore di maturazione autocrino per promuovere la maturazione delle DC. Il blocco del TNF-a metterà le DC in uno stadio immaturo, impedendo loro di esercitare pienamente la loro funzione di presentazione dell'antigene. I dati ELISA in questo studio hanno mostrato che il livello di secrezione di IL-10 nel gruppo PFC era significativamente aumentato rispetto agli altri due gruppi, indicando che PFC migliora la tolleranza immunitaria delle DC; I crescenti livelli di secrezione di IL-6 e TNF-a suggeriscono che il PFC può avere l’effetto di potenziare le DC per promuovere la differenziazione delle cellule T.