Полісахариди з Chlorella (PFC), як природний полісахарид, привернули багато уваги вчених в останні роки завдяки його перевагам низької токсичності, низьких побічних ефектів і широкого спектру дії. Його функції щодо зниження рівня ліпідів у крові, протипухлинної, протизапальної, проти Паркінсона, проти старіння тощо були попередньо підтверджені експериментами in vitro та in vivo. Проте все ще є прогалина в дослідженнях ПФК як імуномодулятора людини.

Дендритні клітини (ДК) є найпотужнішими спеціалізованими антигенпрезентуючими клітинами в організмі людини. Кількість ДК в організмі людини надзвичайно мала, і зазвичай використовується модель індукції in vitro, опосередкована цитокінами, а саме ДК периферичної крові людини, отримані з мононуклеарних клітин (moDC). У 1992 році вперше було повідомлено про індуковану in vitro модель DC, яка є традиційною системою культивування DC. Як правило, вимагає культивування протягом 6-7 днів. Клітини кісткового мозку миші можна культивувати з колонієстимулюючим фактором гранулоцитарних макрофагів (GM-CSF) та інтерлейкіном (IL) -4 для отримання незрілих DC (група PBS). Цитокіни додають як зрілі стимули та культивують протягом 1-2 днів для отримання зрілих DC. Інше дослідження показало, що очищені клітини CD14+ людини культивували з інтерфероном – β (IFN – β) або IL-4 протягом 5 днів, а потім культивували з фактором некрозу пухлини (TNF-a) протягом 2 днів для отримання ДК з високим експресія CD11c і CD83, які мають сильнішу здатність сприяти проліферації алогенних CD4+T-клітин і CD8+T-клітин. Численні полісахариди з природних джерел мають відмінну імуномодулюючу дію, такі як полісахариди з грибів шиітаке, розщеплених грибів, грибів Юньчжі та кокосових грибів, які застосовувалися в клінічній практиці. Вони можуть ефективно покращувати імунну функцію організму, підвищувати імунітет і служити допоміжною терапією для протипухлинного лікування. Проте є кілька звітів про дослідження ПФК як імуномодулятора людини. Таким чином, у цій статті проводиться попереднє дослідження ролі та відповідних механізмів PFC у сприянні дозріванню moDC, щоб оцінити потенціал PFC як природного імуномодулятора.

Завдяки надзвичайно низькій частці ДК у тканинах людини та високому міжвидовому збереженню між ДК миші та ДК людини, щоб вирішити труднощі дослідження, спричинені низьким виробництвом ДК, моделі індукції ДК in vitro, отримані з мононуклеарних клітин периферичної крові людини були вивчені, які можуть отримати DC з хорошою імуногенністю за короткий період часу. Тому в цьому дослідженні використовувався традиційний метод індукції ДК людини in vitro: спільне культивування rhGM CSF і rhIL-4 in vitro, зміна середовища через день і отримання незрілих ДК на 5-й день; На 6-й день рівні об’єми PBS, PFC та LPS додавали відповідно до групування та культивували протягом 24 годин як протокол культивування для індукції DC, отриманих з мононуклеарних клітин периферичної крові людини.

Полісахариди, отримані з природних продуктів, мають низьку токсичність і низьку вартість як імуностимулятори. Після попередніх експериментів наша дослідницька група виявила, що PFC значно посилює зрілий маркер CD83 на поверхні мононуклеарних клітин периферичної крові людини DC, індукованих in vitro. Результати проточної цитометрії показали, що втручання PFC у концентрації 10 мкг/мл протягом 24 годин призвело до пікової експресії зрілого маркера CD83 на поверхні DC, що вказує на те, що DC увійшли в зрілий стан. Тому наша дослідницька група визначила план індукції та втручання in vitro. CD83 є важливим зрілим біомаркером на поверхні DC, тоді як CD86 служить важливою костимулюючою молекулою на поверхні DC, діючи як другий сигнал для активації Т-клітин. Посилена експресія двох біомаркерів CD83 і CD86 вказує на те, що PFC сприяє дозріванню DC, отриманих з мононуклеарних клітин периферичної крові людини, припускаючи, що PFC може одночасно збільшувати рівень секреції цитокінів на поверхні DC. Таким чином, це дослідження оцінювало рівні цитокінів IL-6, TNF-a та IL-10, що виділяються DC за допомогою ELISA. ІЛ-10 тісно пов’язаний з імунною толерантністю до ДК, і ДК з імунною толерантністю зазвичай використовуються в лікуванні пухлин, надаючи потенційні терапевтичні ідеї для імунної толерантності при трансплантації органів; Родина 1L-6 відіграє важливу роль у вродженому та адаптованому імунітеті, кровотворенні та протизапальній дії; Є дослідження, які вказують на те, що IL-6 і TGF β спільно беруть участь у диференціюванні клітин Th17; Коли організм захоплюється вірусом, TNF-a, що виробляється DC у відповідь на активацію вірусу, діє як аутокринний фактор дозрівання, що сприяє дозріванню DC. Блокування TNF-a переведе DC у незрілу стадію, не дозволяючи їм повністю виконувати свою функцію презентації антигену. Дані ELISA в цьому дослідженні показали, що рівень секреції IL-10 у групі PFC був значно підвищений порівняно з двома іншими групами, що вказує на те, що PFC підвищує імунну толерантність до DC; Підвищення рівня секреції IL-6 і TNF-a свідчить про те, що PFC може мати ефект посилення DC для сприяння диференціації Т-клітин.