Doğal bir polisakkarit olan Chlorella polisakkariti (PFC), düşük toksisite, düşük yan etkiler ve geniş spektrumlu etkileri nedeniyle son yıllarda bilim adamlarının büyük ilgisini çekmiştir. Kan lipitlerini düşürme, anti-tümör, antiinflamatuar, anti-Parkinson, anti-aging vb. fonksiyonları in vitro ve in vivo deneylerde ön olarak doğrulanmıştır. Ancak PFC'nin insan bağışıklık modülatörü olarak kullanımıyla ilgili araştırmalarda hala bir boşluk var.

Dendritik hücreler (DC'ler), insan vücudundaki en güçlü özelleşmiş antijen sunan hücrelerdir. İnsan vücudundaki DC'lerin sayısı son derece küçüktür ve sitokin aracılı in vitro indüksiyon modeli, yani insan periferik kan mononükleer hücreden türetilen DC'ler (moDC'ler) yaygın olarak kullanılır. DC'ler için geleneksel kültür sistemi olan in vitro indüklenen DC modeli ilk olarak 1992'de rapor edildi. Genellikle 6-7 gün ekim gerektirir. Fare kemik iliği hücreleri, olgunlaşmamış DC'ler (PBS grubu) elde etmek için granülosit makrofaj koloni uyarıcı faktör (GM-CSF) ve interlökin (IL) -4 ile kültürlenebilir. Sitokinler olgun uyaran olarak eklenir ve olgun DC'ler elde etmek için 1-2 gün kültürlenir. Başka bir çalışma, saflaştırılmış insan CD14+ hücrelerinin interferon – β (IFN – β) veya IL-4 ile 5 gün boyunca kültürlendiğini ve daha sonra yüksek konsantrasyonlu DC'ler elde etmek için 2 gün boyunca tümör nekroz faktörü-a (TNF-a) ile kültürlendiğini bildirdi. allojeneik CD4+T hücrelerinin ve CD8+T hücrelerinin çoğalmasını teşvik etme konusunda daha güçlü yeteneğe sahip olan CD11c ve CD83'ün ekspresyonu. Doğal kaynaklardan elde edilen çok sayıda polisakkarit, klinik uygulamada uygulanan shiitake mantarları, bölünmüş solungaç mantarları, Yunzhi mantarları ve Poria cocos'tan elde edilen polisakkaritler gibi mükemmel immünomodülatör aktiviteye sahiptir. Vücudun bağışıklık fonksiyonunu etkili bir şekilde iyileştirebilir, bağışıklığı güçlendirebilir ve anti-tümör tedavisi için adjuvan tedavi olarak hizmet edebilirler. Ancak PFC'nin insan bağışıklık modülatörü olduğuna dair çok az araştırma raporu var. Bu nedenle, bu makale, PFC'nin doğal bir bağışıklık modülatörü olarak potansiyelini değerlendirmek amacıyla, PFC'nin moDC'lerin olgunlaşmasını teşvik etmedeki rolü ve ilgili mekanizmaları hakkında ön araştırma yürütmektedir.

İnsan dokularındaki son derece düşük DC oranı ve fare DC'leri ile insan DC'leri arasındaki yüksek türler arası koruma nedeniyle, düşük DC üretiminin neden olduğu araştırma zorluklarını çözmek amacıyla, insan periferik kan mononükleer hücrelerinden türetilen DC'lerin in vitro indüksiyon modelleri Kısa sürede iyi immünojeniteye sahip DC'ler elde edebilen çalışmalar yapılmıştır. Bu nedenle, bu çalışmada insan DC'lerini in vitro indüklemeye yönelik geleneksel yöntem kullanıldı: rhGM CSF ve rhIL-4'ün in vitro birlikte kültürlenmesi, ortamın günaşırı değiştirilmesi ve olgunlaşmamış DC'lerin 5. günde elde edilmesi; 6. günde eşit hacimlerde PBS, PFC ve LPS gruplandırmaya göre eklendi ve insan periferik kan mononükleer hücrelerinden türetilen DC'leri indüklemek için kültür protokolü olarak 24 saat kültürlendi.

Doğal ürünlerden türetilen polisakkaritler, bağışıklık uyarıcı olarak düşük toksisite ve düşük maliyet avantajlarına sahiptir. Ön deneylerden sonra araştırma grubumuz, PFC'nin, in vitro olarak indüklenen insan periferik kan mononükleer hücre türevli DC hücrelerinin yüzeyindeki olgun işaretleyici CD83'ü önemli ölçüde arttırdığını buldu. Akış sitometrisi sonuçları, 24 saat boyunca 10 μg/mL konsantrasyonda PFC müdahalesinin, DC'lerin yüzeyinde olgun işaretleyici CD83'ün en yüksek düzeyde ekspresyonuyla sonuçlandığını gösterdi; bu, DC'lerin olgun bir duruma girdiğini gösterir. Bu nedenle araştırma grubumuz in vitro indüksiyon ve müdahale planını belirledi. CD83, DC'lerin yüzeyinde önemli bir olgun biyobelirteçtir; CD86 ise DC'lerin yüzeyinde önemli bir ortak uyarıcı molekül olarak görev yapar ve T hücrelerini aktive etmek için ikinci sinyal görevi görür. İki biyobelirteç CD83 ve CD86'nın geliştirilmiş ifadesi, PFC'nin insan periferik kan mononükleer hücre kaynaklı DC'lerin olgunlaşmasını desteklediğini gösterir; bu da PFC'nin aynı anda DC'lerin yüzeyinde sitokinlerin salgılanma seviyesini artırabileceğini düşündürür. Bu nedenle bu çalışma, ELISA kullanılarak DC'ler tarafından salgılanan IL-6, TNF-a ve IL-10 sitokinlerinin seviyelerini değerlendirdi. IL-10, DC'lerin immün toleransı ile yakından ilişkilidir ve immün toleranslı DC'ler, tümör tedavisinde yaygın olarak kullanılır ve organ transplantasyonunda immün tolerans için potansiyel terapötik fikirler sağlar; 1L-6 ailesi, doğuştan gelen ve kazanılmış bağışıklık, hematopoez ve antiinflamatuar etkilerde önemli bir rol oynar; IL-6 ve TGF β'nın Th17 hücrelerinin farklılaşmasına ortaklaşa katıldığını gösteren çalışmalar vardır; Vücut bir virüs tarafından istila edildiğinde, virüs aktivasyonuna yanıt olarak DC'ler tarafından üretilen TNF-a, DC olgunlaşmasını teşvik etmek için bir otokrin olgunlaşma faktörü olarak görev yapar. TNF-a'nın bloke edilmesi DC'leri olgunlaşmamış bir aşamaya sokacak ve onların antijen sunum fonksiyonlarını tam olarak yerine getirmelerini engelleyecektir. Bu çalışmadaki ELISA verileri, PFC grubunda IL-10 salgılama seviyesinin diğer iki gruba kıyasla önemli ölçüde arttığını gösterdi; bu da PFC'nin DC'lerin immün toleransını arttırdığını gösterir; IL-6 ve TNF-a'nın artan salgı seviyeleri, PFC'nin, T hücresi farklılaşmasını teşvik etmek için DC'yi arttırma etkisine sahip olabileceğini düşündürmektedir.