Polysackarid från Chlorella (PFC), som en naturlig polysackarid, har rönt mycket uppmärksamhet från forskare de senaste åren på grund av dess fördelar med låg toxicitet, låga biverkningar och bredspektrumeffekter. Dess funktioner för att sänka blodlipider, anti-tumör, antiinflammatorisk, anti Parkinsons, anti-aging, etc. har preliminärt validerats in vitro och in vivo experiment. Det finns dock fortfarande en lucka i forskningen om PFC som en human immunmodulator.

Dendritiska celler (DC) är de mest kraftfulla specialiserade antigenpresenterande cellerna i människokroppen. Antalet DCs i människokroppen är extremt litet, och en cytokinförmedlad in vitro-induktionsmodell, nämligen humant perifert blod mononukleära cell-derived DCs (moDCs), används ofta. Den in vitro-inducerade DC-modellen rapporterades första gången 1992, vilket är det traditionella odlingssystemet för DC. I allmänhet kräver den odling i 6-7 dagar. Musbenmärgsceller kan odlas med granulocytmakrofagkolonistimulerande faktor (GM-CSF) och interleukin (IL) -4 för att erhålla omogna DCs (PBS-grupp). Cytokiner tillsätts som mogna stimuli och odlas i 1-2 dagar för att erhålla mogna DC. En annan studie rapporterade att renade humana CD14+-celler odlades med interferon – β (IFN – β) eller IL-4 i 5 dagar och sedan odlades med tumörnekrosfaktor-a (TNF-a) i 2 dagar för att erhålla DC med hög uttryck av CD11c och CD83, som har starkare förmåga att främja proliferationen av allogena CD4+T-celler och CD8+T-celler. Många polysackarider från naturliga källor har utmärkt immunmodulerande aktivitet, såsom polysackarider från shiitakesvamp, delad gälsvamp, Yunzhi-svamp och Poria cocos, som har använts i klinisk praxis. De kan effektivt förbättra kroppens immunfunktion, förbättra immuniteten och fungera som adjuvansterapier för antitumörbehandling. Det finns dock få forskningsrapporter om PFC som en human immunmodulator. Därför bedriver denna artikel preliminär forskning om rollen och relaterade mekanismer för PFC för att främja mognad av moDCs, för att utvärdera potentialen för PFC som en naturlig immunmodulator.

På grund av den extremt låga andelen DCs i mänskliga vävnader och det höga bevarandet mellan arter mellan mus DCs och humana DCs, för att lösa forskningssvårigheterna orsakade av låg DC-produktion, in vitro-induktionsmodeller av DCs härledda från humana perifera mononukleära blodceller har studerats, vilket kan erhålla DC med god immunogenicitet på kort tid. Därför använde denna studie den traditionella metoden för att inducera humana DCs in vitro: samodling av rhGM CSF och rhIL-4 in vitro, byte av medium varannan dag och erhållande av omogna DCs på den 5:e dagen; På den 6:e dagen tillsattes lika volymer av PBS, PFC och LPS enligt gruppering och odlades i 24 timmar som odlingsprotokollet för att inducera DCs härledda från humana perifera mononukleära blodceller.

Polysackarider som härrör från naturliga produkter har fördelarna med låg toxicitet och låg kostnad som immunstimulerande medel. Efter preliminära experiment fann vår forskargrupp att PFC signifikant förbättrar den mogna markören CD83 på ytan av DC-celler härledda från humana perifera mononukleära blodceller inducerade in vitro. Flödescytometriresultat visade att PFC-intervention vid en koncentration av 10 μ g/ml under 24 timmar resulterade i ett topputtryck av den mogna markören CD83 på ytan av DCs, vilket indikerar att DCs gick in i ett moget tillstånd. Därför bestämde vår forskargrupp in vitro-induktions- och interventionsplanen. CD83 är en viktig mogen biomarkör på ytan av DCs, medan CD86 fungerar som en viktig co-stimulerande molekyl på DCs yta, och fungerar som den andra signalen för att aktivera T-celler. Det förstärkta uttrycket av två biomarkörer CD83 och CD86 indikerar att PFC främjar mognad av humana perifera mononukleära blodceller härledda DCs, vilket tyder på att PFC samtidigt kan öka utsöndringsnivån av cytokiner på ytan av DCs. Därför utvärderade denna studie nivåerna av cytokinerna IL-6, TNF-a och IL-10 som utsöndras av DC med hjälp av ELISA. IL-10 är nära besläktad med DC:s immuntolerans, och DC:er med immuntolerans används ofta vid tumörbehandling, vilket ger potentiella terapeutiska idéer för immuntolerans vid organtransplantation; 1L-6-familjen spelar en viktig roll i medfödd och adaptiv immunitet, hematopoiesis och antiinflammatoriska effekter; Det finns studier som indikerar att IL-6 och TGF β gemensamt deltar i differentieringen av Th17-celler; När kroppen invaderas av ett virus, fungerar TNF-a som produceras av DC som svar på virusaktivering som en autokrin mognadsfaktor för att främja DC-mognad. Blockering av TNF-a kommer att försätta DCs i ett omoget stadium, vilket hindrar dem från att helt utöva sin antigenpresentationsfunktion. ELISA-data i denna studie visade att sekretionsnivån av IL-10 i PFC-gruppen ökade signifikant jämfört med de andra två grupperna, vilket indikerar att PFC ökar immuntoleransen hos DC; De ökande utsöndringsnivåerna av IL-6 och TNF-a tyder på att PFC kan ha effekten att förstärka DC för att främja T-cellsdifferentiering.