Polisaharid iz klorele (PFC) je kot naravni polisaharid v zadnjih letih pritegnil veliko pozornosti znanstvenikov zaradi svojih prednosti nizke toksičnosti, nizkih stranskih učinkov in učinkov širokega spektra. Njegove funkcije pri zniževanju lipidov v krvi, protitumorskem, protivnetnem, proti Parkinsonovi bolezni, proti staranju itd. so bile predhodno potrjene s poskusi in vitro in in vivo. Vendar pa še vedno obstaja vrzel v raziskavah PFC kot modulatorja človeškega imunskega sistema.

Dendritične celice (DC) so najmočnejše specializirane celice, ki predstavljajo antigen v človeškem telesu. Število DC v človeškem telesu je izredno majhno in pogosto se uporablja model in vitro indukcije s citokini, in sicer DC-ji, pridobljeni iz mononuklearnih celic periferne krvi (moDC). O in vitro induciranem DC modelu so prvič poročali leta 1992, kar je tradicionalni sistem kulture za DC. Na splošno zahteva gojenje 6-7 dni. Celice mišjega kostnega mozga lahko gojimo s faktorjem, ki spodbuja kolonijo granulocitnih makrofagov (GM-CSF) in interlevkinom (IL) -4, da dobimo nezrele DC (skupina PBS). Citokine dodamo kot zrele dražljaje in jih gojimo 1-2 dni, da dobimo zrele DC. Druga študija je poročala, da so očiščene človeške celice CD14+ 5 dni gojili z interferonom – β (IFN – β) ali IL-4 in nato 2 dni gojili s faktorjem tumorske nekroze-a (TNF-a), da so dobili DC z visoko izražanje CD11c in CD83, ki imata močnejšo sposobnost spodbujanja proliferacije alogenskih celic CD4+T in celic CD8+T. Številni polisaharidi iz naravnih virov imajo odlično imunomodulatorno delovanje, kot so polisaharidi iz gob shiitake, gob split gill, gob Yunzhi in kokosovega poria, ki so bili uporabljeni v klinični praksi. Učinkovito lahko izboljšajo imunsko funkcijo telesa, okrepijo imunost in služijo kot adjuvantne terapije za protitumorsko zdravljenje. Vendar pa je malo raziskovalnih poročil o PFC kot modulatorju človeškega imunskega sistema. Zato ta članek izvaja predhodne raziskave o vlogi in povezanih mehanizmih PFC pri spodbujanju zorenja moDC, da bi ocenili potencial PFC kot naravnega imunskega modulatorja.

Zaradi izjemno nizkega deleža DC v človeških tkivih in visoke medvrstne ohranjenosti med mišjimi DC in človeškimi DC, da bi rešili raziskovalne težave, ki jih povzroča nizka proizvodnja DC, in vitro modele indukcije DC, pridobljenih iz človeških mononuklearnih celic periferne krvi ki lahko v kratkem času pridobijo DC z dobro imunogenostjo. Zato je ta študija uporabila tradicionalno metodo indukcije človeških DC in vitro: skupno gojenje rhGM CSF in rhIL-4 in vitro, menjava medija vsak drugi dan in pridobivanje nezrelih DC 5. dan; 6. dan smo dodali enake količine PBS, PFC in LPS glede na skupino in gojili 24 ur kot protokol kulture za induciranje DC, pridobljenih iz človeških mononuklearnih celic periferne krvi.

Polisaharidi, pridobljeni iz naravnih proizvodov, imajo kot imunostimulansi nizko toksičnost in nizko ceno. Po preliminarnih poskusih je naša raziskovalna skupina ugotovila, da PFC bistveno izboljša zrel marker CD83 na površini DC celic, pridobljenih iz mononuklearnih celic periferne krvi, induciranih in vitro. Rezultati pretočne citometrije so pokazali, da je intervencija PFC pri koncentraciji 10 μ g/mL 24 ur povzročila najvišjo ekspresijo zrelega markerja CD83 na površini DC, kar kaže, da so DC prešli v zrelo stanje. Zato je naša raziskovalna skupina določila načrt in vitro indukcije in intervencije. CD83 je pomemben zrel biomarker na površini DC, medtem ko CD86 služi kot pomembna kostimulacijska molekula na površini DC, ki deluje kot drugi signal za aktiviranje T celic. Okrepljeno izražanje dveh biomarkerjev CD83 in CD86 kaže, da PFC spodbuja zorenje DC-jev, pridobljenih iz mononuklearnih celic periferne krvi, kar kaže, da lahko PFC hkrati poveča raven izločanja citokinov na površini DC-jev. Zato je ta študija ocenila ravni citokinov IL-6, TNF-a in IL-10, ki jih izločajo DC z uporabo ELISA. IL-10 je tesno povezan z imunsko toleranco DC, DC z imunsko toleranco pa se pogosto uporabljajo pri zdravljenju tumorjev, kar zagotavlja potencialne terapevtske ideje za imunsko toleranco pri presaditvi organov; Družina 1L-6 ima pomembno vlogo pri prirojeni in adaptivni imunosti, hematopoezi in protivnetnih učinkih; Obstajajo študije, ki kažejo, da IL-6 in TGF β skupaj sodelujeta pri diferenciaciji celic Th17; Ko telo napade virus, TNF-a, ki ga proizvajajo DC kot odgovor na aktivacijo virusa, deluje kot avtokrini dejavnik zorenja za spodbujanje zorenja DC. Blokiranje TNF-a bo postavilo DC v nezrelo fazo in jim preprečilo, da bi v celoti izvajali svojo funkcijo predstavitve antigena. Podatki ELISA v tej študiji so pokazali, da je bila raven izločanja IL-10 v skupini s PFC znatno povečana v primerjavi z drugima dvema skupinama, kar kaže, da PFC poveča imunsko toleranco za DC; Naraščajoče ravni izločanja IL-6 in TNF-a kažejo, da lahko PFC vpliva na povečanje DC za spodbujanje diferenciacije celic T.