Polysacharid z Chlorelly (PFC), ako prírodný polysacharid, pritiahol v posledných rokoch veľkú pozornosť vedcov pre svoje výhody nízkej toxicity, nízkych vedľajších účinkov a širokospektrálnych účinkov. Jeho funkcie pri znižovaní krvných lipidov, protinádorové, protizápalové, proti Parkinsonovej chorobe, proti starnutiu atď. boli predbežne overené in vitro a in vivo experimentmi. Stále však existuje medzera vo výskume PFC ako ľudského imunitného modulátora.

Dendritické bunky (DC) sú najsilnejšie špecializované bunky prezentujúce antigén v ľudskom tele. Počet DC v ľudskom tele je extrémne malý a bežne sa používa in vitro model indukcie sprostredkovaný cytokínom, konkrétne DC odvodené z ľudských periférnych krvných mononukleárnych buniek (moDC). Model DC indukovaný in vitro bol prvýkrát opísaný v roku 1992, čo je tradičný kultivačný systém pre DC. Vo všeobecnosti vyžaduje kultiváciu 6-7 dní. Bunky kostnej drene myši sa môžu kultivovať s faktorom stimulujúcim kolónie granulocytov a makrofágov (GM-CSF) a interleukínom (IL)-4, aby sa získali nezrelé DC (skupina PBS). Cytokíny sa pridávajú ako zrelé stimuly a kultivujú sa 1-2 dni, aby sa získali zrelé DC. Ďalšia štúdia uvádza, že purifikované ľudské CD14+ bunky sa kultivovali s interferónom – β (IFN – β) alebo IL-4 počas 5 dní a potom sa kultivovali s tumor nekrotizujúcim faktorom-a (TNF-a) počas 2 dní, aby sa získali DC s vysokým expresiu CD11c a CD83, ktoré majú silnejšiu schopnosť podporovať proliferáciu alogénnych CD4+T buniek a CD8+T buniek. Vynikajúcu imunomodulačnú aktivitu majú viaceré polysacharidy z prírodných zdrojov, ako napríklad polysacharidy z húb shiitake, žubrienky, huby Yunzhi a Cocos, ktoré boli aplikované v klinickej praxi. Dokážu účinne zlepšiť imunitnú funkciu organizmu, posilniť imunitu a slúžiť ako pomocná liečba pri protinádorovej liečbe. Existuje však len málo výskumných správ o PFC ako o ľudskom imunomodulátore. Tento článok preto vykonáva predbežný výskum úlohy a súvisiacich mechanizmov PFC pri podpore dozrievania moDC, aby sa vyhodnotil potenciál PFC ako prirodzeného modulátora imunity.

Kvôli extrémne nízkemu podielu DC v ľudských tkanivách a vysokej medzidruhovej ochrane medzi myšími DC a ľudskými DC, aby sa vyriešili výskumné ťažkosti spôsobené nízkou produkciou DC, in vitro indukčné modely DC odvodené z ľudských mononukleárnych buniek periférnej krvi boli študované, ktoré môžu získať DC s dobrou imunogenicitou v krátkom časovom období. Preto sa v tejto štúdii použil tradičný spôsob indukcie ľudských DC in vitro: spoločná kultivácia rhGM CSF a rhIL-4 in vitro, výmena média každý druhý deň a získanie nezrelých DC na 5. deň; Na 6. deň sa pridali rovnaké objemy PBS, PFC a LPS podľa zoskupenia a kultivovali sa 24 hodín ako kultivačný protokol na indukciu DC odvodených z ľudských mononukleárnych buniek periférnej krvi.

Polysacharidy odvodené z prírodných produktov majú ako imunostimulanty výhody nízkej toxicity a nízkej ceny. Po predbežných experimentoch naša výskumná skupina zistila, že PFC významne zvyšuje zrelý marker CD83 na povrchu ľudských DC buniek odvodených z mononukleárnych buniek periférnej krvi indukovaných in vitro. Výsledky prietokovej cytometrie ukázali, že zásah PFC pri koncentrácii 10 μg/ml počas 24 hodín viedol k maximálnej expresii zrelého markera CD83 na povrchu DC, čo naznačuje, že DC vstúpili do zrelého stavu. Preto naša výskumná skupina určila in vitro plán indukcie a intervencie. CD83 je dôležitým zrelým biomarkerom na povrchu DC, zatiaľ čo CD86 slúži ako dôležitá kostimulačná molekula na povrchu DC, ktorá pôsobí ako druhý signál pre aktiváciu T buniek. Zvýšená expresia dvoch biomarkerov CD83 a CD86 naznačuje, že PFC podporuje dozrievanie DC derivovaných z ľudských periférnych krvných mononukleárnych buniek, čo naznačuje, že PFC môže súčasne zvyšovať hladinu sekrécie cytokínov na povrchu DC. Preto táto štúdia hodnotila hladiny cytokínov IL-6, TNF-a a IL-10 vylučovaných DC pomocou ELISA. IL-10 úzko súvisí s imunitnou toleranciou DC a DC s imunitnou toleranciou sa bežne používajú pri liečbe nádorov, čo poskytuje potenciálne terapeutické nápady pre imunitnú toleranciu pri transplantácii orgánov; Rodina 1L-6 hrá dôležitú úlohu vo vrodenej a adaptívnej imunite, hematopoéze a protizápalových účinkoch; Existujú štúdie, ktoré naznačujú, že IL-6 a TGF p sa spoločne podieľajú na diferenciácii Th17 buniek; Keď je telo napadnuté vírusom, TNF-a produkovaný DC v reakcii na aktiváciu vírusu pôsobí ako autokrinný faktor dozrievania na podporu dozrievania DC. Blokovanie TNF-a privedie DC do nezrelého štádia, čo im zabráni plne uplatniť svoju funkciu prezentácie antigénu. Údaje ELISA v tejto štúdii ukázali, že hladina sekrécie IL-10 v skupine PFC bola významne zvýšená v porovnaní s ďalšími dvoma skupinami, čo naznačuje, že PFC zvyšuje imunitnú toleranciu DC; Zvyšujúce sa hladiny sekrécie IL-6 a TNF-a naznačujú, že PFC môže mať účinok na zvýšenie DC na podporu diferenciácie T buniek.