Polizaharida din Chlorella (PFC), ca polizaharidă naturală, a atras multă atenție din partea cercetătorilor în ultimii ani datorită avantajelor sale de toxicitate scăzută, efecte secundare scăzute și efecte cu spectru larg. Funcțiile sale în scăderea lipidelor din sânge, antitumoral, antiinflamator, anti Parkinson, anti-îmbătrânire etc. au fost validate preliminar în experimente in vitro și in vivo. Cu toate acestea, există încă un gol în cercetarea asupra PFC ca modulator imunitar uman.

Celulele dendritice (DC) sunt cele mai puternice celule specializate prezentatoare de antigen din corpul uman. Numărul de DC din corpul uman este extrem de mic și un model de inducție in vitro mediat de citokine, și anume DC-uri derivate din celulele mononucleare din sângele periferic uman (moDC), este utilizat în mod obișnuit. Modelul DC indus in vitro a fost raportat pentru prima dată în 1992, care este sistemul tradițional de cultură pentru DC. În general, necesită cultivare timp de 6-7 zile. Celulele de măduvă osoasă de șoarece pot fi cultivate cu factor de stimulare a coloniilor de macrofage de granulocite (GM-CSF) și interleukină (IL) -4 pentru a obține DC imature (grup PBS). Citokinele sunt adăugate ca stimuli maturi și cultivate timp de 1-2 zile pentru a obține DC mature. Un alt studiu a raportat că celulele CD14+ umane purificate au fost cultivate cu interferon – β (IFN – β) sau IL-4 timp de 5 zile și apoi cultivate cu factor de necroză tumorală-a (TNF-a) timp de 2 zile pentru a obține DC cu un nivel ridicat. expresia CD11c și CD83, care au o capacitate mai puternică de a promova proliferarea celulelor alogene CD4+T și a celulelor CD8+T. Numeroase polizaharide din surse naturale au o activitate imunomodulatoare excelentă, cum ar fi polizaharidele din ciupercile shiitake, ciupercile branhiale despicate, ciupercile Yunzhi și cocos Poria, care au fost aplicate în practica clinică. Acestea pot îmbunătăți în mod eficient funcția imunitară a organismului, pot spori imunitatea și pot servi ca terapii adjuvante pentru tratamentul antitumoral. Cu toate acestea, există puține rapoarte de cercetare privind PFC ca modulator imun uman. Prin urmare, acest articol efectuează cercetări preliminare privind rolul și mecanismele conexe ale PFC în promovarea maturizării moDC, pentru a evalua potențialul PFC ca modulator imun natural.

Datorită proporției extrem de scăzute de DC în țesuturile umane și conservării mari între specii dintre DC de șoarece și DC umane, pentru a rezolva dificultățile de cercetare cauzate de producția scăzută de DC, modele de inducție in vitro a DC derivate din celule mononucleare din sângele periferic uman. au fost studiate, care pot obține DC cu imunogenitate bună într-o perioadă scurtă de timp. Prin urmare, acest studiu a folosit metoda tradițională de inducere a DC umane in vitro: co-cultivarea rhGM CSF și rhIL-4 in vitro, schimbarea mediului la două zile și obținerea DC imature în a 5-a zi; În a 6-a zi, au fost adăugate volume egale de PBS, PFC și LPS conform grupării și cultivate timp de 24 de ore ca protocol de cultură pentru inducerea DC derivate din celule mononucleare din sângele periferic uman.

Polizaharidele derivate din produse naturale au avantajele toxicității scăzute și costurilor reduse ca imunostimulatori. După experimente preliminare, grupul nostru de cercetare a descoperit că PFC îmbunătățește semnificativ markerul matur CD83 de pe suprafața celulelor DC derivate din celule mononucleare din sângele periferic uman induse in vitro. Rezultatele citometriei în flux au arătat că intervenția PFC la o concentrație de 10 μ g/mL timp de 24 de ore a dus la o expresie maximă a markerului matur CD83 pe suprafața DC, indicând faptul că DC au intrat într-o stare matură. Prin urmare, grupul nostru de cercetare a determinat planul de inducție și intervenție in vitro. CD83 este un biomarker matur important pe suprafața DC, în timp ce CD86 servește ca o moleculă co-stimulatoare importantă pe suprafața DC, acționând ca al doilea semnal pentru activarea celulelor T. Expresia îmbunătățită a doi biomarkeri CD83 și CD86 indică faptul că PFC promovează maturarea DC-urilor derivate din celulele mononucleare din sângele periferic uman, sugerând că PFC poate crește simultan nivelul de secreție al citokinelor pe suprafața DC. Prin urmare, acest studiu a evaluat nivelurile de citokine IL-6, TNF-a și IL-10 secretate de DC folosind ELISA. IL-10 este strâns legată de toleranța imună a DC, iar DC cu toleranță imună sunt utilizate în mod obișnuit în tratamentul tumorii, oferind idei terapeutice potențiale pentru toleranța imună în transplantul de organe; Familia 1L-6 joacă un rol important în imunitatea înnăscută și adaptativă, hematopoieza și efectele antiinflamatorii; Există studii care indică faptul că IL-6 și TGF p participă împreună la diferențierea celulelor Th17; Când organismul este invadat de un virus, TNF-a produs de DC ca răspuns la activarea virusului acționează ca un factor de maturare autocrin pentru a promova maturarea DC. Blocarea TNF-a va pune DC-urile într-un stadiu imatur, împiedicându-le să își exercite pe deplin funcția de prezentare a antigenului. Datele ELISA din acest studiu au arătat că nivelul de secreție de IL-10 în grupul PFC a fost semnificativ crescut în comparație cu celelalte două grupuri, ceea ce indică faptul că PFC sporește toleranța imună a DC; Creșterea nivelurilor de secreție de IL-6 și TNF-a sugerează că PFC poate avea efectul de a crește DC pentru a promova diferențierea celulelor T.