Polisakarida daripada Chlorella (PFC), sebagai polisakarida semula jadi, telah menarik banyak perhatian daripada para sarjana sejak beberapa tahun kebelakangan ini kerana kelebihan ketoksikan yang rendah, kesan sampingan yang rendah dan kesan spektrum luas. Fungsinya dalam menurunkan lipid darah, anti-tumor, anti-radang, anti Parkinson, anti-penuaan, dan lain-lain telah disahkan terlebih dahulu dalam eksperimen in vitro dan in vivo. Walau bagaimanapun, masih terdapat jurang dalam penyelidikan mengenai PFC sebagai modulator imun manusia.

Sel dendritik (DC) adalah sel pembentang antigen khusus yang paling berkuasa dalam tubuh manusia. Bilangan DC dalam badan manusia adalah sangat kecil, dan model induksi in vitro yang dimediasi sitokin, iaitu DC yang diperolehi sel mononuklear darah periferal manusia (moDC), biasanya digunakan. Model DC teraruh in vitro pertama kali dilaporkan pada tahun 1992, yang merupakan sistem budaya tradisional untuk DC. Secara amnya, ia memerlukan penanaman selama 6-7 hari. Sel sumsum tulang tetikus boleh dikultur dengan faktor perangsang koloni makrofaj granulosit (GM-CSF) dan interleukin (IL) -4 untuk mendapatkan DC yang tidak matang (kumpulan PBS). Sitokin ditambah sebagai rangsangan matang dan dibiakkan selama 1-2 hari untuk mendapatkan DC matang. Satu lagi kajian melaporkan bahawa sel CD14+ manusia yang telah disucikan telah dikultur dengan interferon - β (IFN - β) atau IL-4 selama 5 hari, dan kemudian dikultur dengan tumor necrosis factor-a (TNF-a) selama 2 hari untuk mendapatkan DC dengan tinggi. ungkapan CD11c dan CD83, yang mempunyai keupayaan yang lebih kuat untuk menggalakkan percambahan sel CD4+T alogenik dan sel CD8+T. Banyak polisakarida daripada sumber semula jadi mempunyai aktiviti imunomodulator yang sangat baik, seperti polisakarida daripada cendawan shiitake, cendawan insang belah, cendawan Yunzhi, dan Poria cocos, yang telah digunakan dalam amalan klinikal. Ia boleh meningkatkan fungsi imun badan dengan berkesan, meningkatkan imuniti, dan berfungsi sebagai terapi tambahan untuk rawatan anti-tumor. Walau bagaimanapun, terdapat beberapa laporan penyelidikan mengenai PFC sebagai modulator imun manusia. Oleh itu, artikel ini menjalankan penyelidikan awal tentang peranan dan mekanisme berkaitan PFC dalam menggalakkan kematangan moDC, untuk menilai potensi PFC sebagai modulator imun semula jadi.

Oleh kerana perkadaran DC yang sangat rendah dalam tisu manusia dan pemuliharaan antara spesies yang tinggi antara DC tetikus dan DC manusia, untuk menyelesaikan kesukaran penyelidikan yang disebabkan oleh pengeluaran DC yang rendah, model induksi in vitro DC yang diperoleh daripada sel mononuklear darah periferi manusia. telah dikaji, yang boleh memperoleh DC dengan imunogenisiti yang baik dalam tempoh yang singkat. Oleh itu, kajian ini menggunakan kaedah tradisional untuk mendorong manusia DC secara in vitro: bersama kultur rhGM CSF dan rhIL-4 in vitro, menukar medium setiap hari, dan mendapatkan DC yang tidak matang pada hari ke-5; Pada hari ke-6, jumlah yang sama PBS, PFC, dan LPS telah ditambah mengikut kumpulan dan dikultur selama 24 jam sebagai protokol kultur untuk mendorong DC yang diperoleh daripada sel mononuklear darah periferal manusia.

Polisakarida yang diperoleh daripada produk semulajadi mempunyai kelebihan ketoksikan yang rendah dan kos rendah sebagai imunostimulan. Selepas eksperimen awal, kumpulan penyelidikan kami mendapati bahawa PFC meningkatkan dengan ketara penanda matang CD83 pada permukaan sel DC yang diperolehi sel mononuklear darah periferal manusia yang diinduksi secara in vitro. Keputusan sitometri aliran menunjukkan bahawa campur tangan PFC pada kepekatan 10 μ g/mL selama 24 jam menghasilkan ekspresi puncak penanda matang CD83 pada permukaan DC, menunjukkan bahawa DC memasuki keadaan matang. Oleh itu, kumpulan penyelidikan kami menentukan rancangan induksi dan intervensi in vitro. CD83 ialah biomarker matang yang penting pada permukaan DC, manakala CD86 berfungsi sebagai molekul stimulasi bersama yang penting pada permukaan DC, bertindak sebagai isyarat kedua untuk mengaktifkan sel T. Ekspresi dua biomarker CD83 dan CD86 yang dipertingkatkan menunjukkan bahawa PFC menggalakkan pematangan DC yang diperolehi sel mononuklear darah periferal manusia, menunjukkan bahawa PFC boleh meningkatkan tahap rembesan sitokin pada permukaan DC secara serentak. Oleh itu, kajian ini menilai tahap sitokin IL-6, TNF-a, dan IL-10 yang dirembeskan oleh DC menggunakan ELISA. IL-10 berkait rapat dengan toleransi imun DC, dan DC dengan toleransi imun biasanya digunakan dalam rawatan tumor, memberikan idea terapeutik yang berpotensi untuk toleransi imun dalam pemindahan organ; Keluarga 1L-6 memainkan peranan penting dalam imuniti semula jadi dan adaptif, hematopoiesis, dan kesan anti-radang; Terdapat kajian yang menunjukkan bahawa IL-6 dan TGF β secara bersama mengambil bahagian dalam pembezaan sel Th17; Apabila badan diserang oleh virus, TNF-a yang dihasilkan oleh DC sebagai tindak balas kepada pengaktifan virus bertindak sebagai faktor kematangan autokrin untuk menggalakkan kematangan DC. Menyekat TNF-a akan meletakkan DC dalam tahap yang tidak matang, menghalang mereka daripada menggunakan sepenuhnya fungsi pembentangan antigen mereka. Data ELISA dalam kajian ini menunjukkan bahawa tahap rembesan IL-10 dalam kumpulan PFC meningkat dengan ketara berbanding dua kumpulan lain, menunjukkan bahawa PFC meningkatkan toleransi imun DC; Peningkatan tahap rembesan IL-6 dan TNF-a menunjukkan bahawa PFC mungkin mempunyai kesan meningkatkan DC untuk menggalakkan pembezaan sel T.