ക്ലോറെല്ലയിൽ നിന്നുള്ള പോളിസാക്രറൈഡ് (PFC), ഒരു സ്വാഭാവിക പോളിസാക്രറൈഡ് എന്ന നിലയിൽ, കുറഞ്ഞ വിഷാംശം, കുറഞ്ഞ പാർശ്വഫലങ്ങൾ, വിശാലമായ സ്പെക്‌ട്രം ഇഫക്റ്റുകൾ എന്നിവയുടെ ഗുണങ്ങൾ കാരണം സമീപ വർഷങ്ങളിൽ പണ്ഡിതന്മാരിൽ നിന്ന് വളരെയധികം ശ്രദ്ധ ആകർഷിച്ചു. രക്തത്തിലെ ലിപിഡുകൾ, ആൻറി ട്യൂമർ, ആൻറി-ഇൻഫ്ലമേറ്ററി, ആൻ്റി പാർക്കിൻസൺസ്, ആൻ്റി-ഏജിംഗ് മുതലായവ കുറയ്ക്കുന്നതിനുള്ള അതിൻ്റെ പ്രവർത്തനങ്ങൾ വിട്രോയിലും വിവോയിലും നടത്തിയ പരീക്ഷണങ്ങളിൽ പ്രാഥമികമായി സാധൂകരിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്. എന്നിരുന്നാലും, ഒരു ഹ്യൂമൻ ഇമ്മ്യൂൺ മോഡുലേറ്റർ എന്ന നിലയിൽ പിഎഫ്‌സിയെക്കുറിച്ചുള്ള ഗവേഷണത്തിൽ ഇപ്പോഴും ഒരു വിടവുണ്ട്.

ഡെൻഡ്രിറ്റിക് സെല്ലുകൾ (ഡിസി) മനുഷ്യ ശരീരത്തിലെ ഏറ്റവും ശക്തമായ പ്രത്യേക ആൻ്റിജൻ അവതരിപ്പിക്കുന്ന കോശങ്ങളാണ്. മനുഷ്യശരീരത്തിലെ ഡിസികളുടെ എണ്ണം വളരെ ചെറുതാണ്, കൂടാതെ വിട്രോ ഇൻഡക്ഷൻ മോഡലിൽ മധ്യസ്ഥതയുള്ള ഒരു സൈറ്റോകൈൻ, അതായത് ഹ്യൂമൻ പെരിഫറൽ ബ്ലഡ് മോണോ ന്യൂക്ലിയർ സെൽ ഡിറൈവ്ഡ് ഡിസികൾ (മോഡിസികൾ) സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കാറുണ്ട്. ഇൻ വിട്രോ ഇൻഡുസ്‌ഡ് ഡിസി മോഡൽ ആദ്യമായി റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തത് 1992-ലാണ്, ഇത് ഡിസികൾക്കുള്ള പരമ്പരാഗത സംസ്‌കാര സംവിധാനമാണ്. സാധാരണയായി, ഇതിന് 6-7 ദിവസം കൃഷി ആവശ്യമാണ്. പ്രായപൂർത്തിയാകാത്ത ഡിസികൾ (പിബിഎസ് ഗ്രൂപ്പ്) ലഭിക്കുന്നതിന് ഗ്രാനുലോസൈറ്റ് മാക്രോഫേജ് കോളനി-സ്റ്റിമുലേറ്റിംഗ് ഫാക്ടർ (ജിഎം-സിഎസ്എഫ്), ഇൻ്റർലൂക്കിൻ (ഐഎൽ) -4 എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് മൗസ് ബോൺ മജ്ജ കോശങ്ങൾ സംസ്കരിക്കാം. പ്രായപൂർത്തിയായ ഉദ്ദീപനങ്ങളായി സൈറ്റോകൈനുകൾ ചേർക്കുകയും മുതിർന്ന ഡിസികൾ ലഭിക്കുന്നതിന് 1-2 ദിവസത്തേക്ക് സംസ്കരിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. ശുദ്ധീകരിക്കപ്പെട്ട മനുഷ്യ CD14+ കോശങ്ങൾ 5 ദിവസത്തേക്ക് ഇൻ്റർഫെറോൺ - β (IFN - β) അല്ലെങ്കിൽ IL-4 ഉപയോഗിച്ച് സംസ്ക്കരിക്കുകയും തുടർന്ന് 2 ദിവസത്തേക്ക് ട്യൂമർ നെക്രോസിസ് ഫാക്ടർ-എ (TNF-a) ഉപയോഗിച്ച് സംസ്കരിച്ച് ഉയർന്ന ഡിസികൾ ലഭിക്കുകയും ചെയ്തുവെന്ന് മറ്റൊരു പഠനം റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തു. അലോജെനിക് CD4+T സെല്ലുകളുടെയും CD8+T സെല്ലുകളുടെയും വ്യാപനത്തെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നതിനുള്ള ശക്തമായ കഴിവുള്ള CD11c, CD83 എന്നിവയുടെ ആവിഷ്‌കാരം. പ്രകൃതിദത്ത സ്രോതസ്സുകളിൽ നിന്നുള്ള നിരവധി പോളിസാക്രറൈഡുകൾക്ക് മികച്ച ഇമ്മ്യൂണോമോഡുലേറ്ററി പ്രവർത്തനമുണ്ട്, ഷിറ്റേക്ക് കൂൺ, സ്പ്ലിറ്റ് ഗിൽ മഷ്റൂം, യുൻസി കൂൺ, പോറിയ കൊക്കോസ് എന്നിവയിൽ നിന്നുള്ള പോളിസാക്രറൈഡുകൾ, ക്ലിനിക്കൽ പ്രാക്ടീസിൽ പ്രയോഗിക്കുന്നു. ശരീരത്തിൻ്റെ രോഗപ്രതിരോധ പ്രവർത്തനം ഫലപ്രദമായി മെച്ചപ്പെടുത്താനും, പ്രതിരോധശേഷി വർദ്ധിപ്പിക്കാനും, ട്യൂമർ വിരുദ്ധ ചികിത്സയ്ക്കുള്ള സഹായ ചികിത്സയായി വർത്തിക്കാനും അവയ്ക്ക് കഴിയും. എന്നിരുന്നാലും, ഒരു ഹ്യൂമൻ ഇമ്മ്യൂൺ മോഡുലേറ്റർ എന്ന നിലയിൽ പിഎഫ്‌സിയെക്കുറിച്ച് കുറച്ച് ഗവേഷണ റിപ്പോർട്ടുകൾ മാത്രമേയുള്ളൂ. അതിനാൽ, സ്വാഭാവിക രോഗപ്രതിരോധ മോഡുലേറ്റർ എന്ന നിലയിൽ PFC യുടെ സാധ്യതകൾ വിലയിരുത്തുന്നതിനായി, moDC-കളുടെ പക്വതയെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നതിൽ PFC യുടെ പങ്കിനെയും അനുബന്ധ സംവിധാനങ്ങളെയും കുറിച്ച് ഈ ലേഖനം പ്രാഥമിക ഗവേഷണം നടത്തുന്നു.

മനുഷ്യ കോശങ്ങളിലെ ഡിസികളുടെ വളരെ കുറഞ്ഞ അനുപാതവും മൗസ് ഡിസികളും ഹ്യൂമൻ ഡിസികളും തമ്മിലുള്ള ഉയർന്ന ഇൻ്റർ സ്പീഷീസ് സംരക്ഷണവും കാരണം, കുറഞ്ഞ ഡിസി ഉൽപ്പാദനം മൂലമുണ്ടാകുന്ന ഗവേഷണ ബുദ്ധിമുട്ടുകൾ പരിഹരിക്കുന്നതിനായി, മനുഷ്യ പെരിഫറൽ ബ്ലഡ് മോണോ ന്യൂക്ലിയർ സെല്ലുകളിൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ ഡിസിയുടെ ഇൻ വിട്രോ ഇൻഡക്ഷൻ മോഡലുകൾ. കുറഞ്ഞ സമയത്തിനുള്ളിൽ നല്ല ഇമ്മ്യൂണോജെനിസിറ്റി ഉള്ള ഡിസികൾ ലഭിക്കുമെന്ന് പഠിച്ചിട്ടുണ്ട്. അതിനാൽ, ഈ പഠനം മനുഷ്യ ഡിസികളെ വിട്രോയിൽ പ്രേരിപ്പിക്കുന്ന പരമ്പരാഗത രീതി ഉപയോഗിച്ചു: കോ കൾച്ചറിംഗ് rhGM CSF, rhIL-4 in vitro, മറ്റെല്ലാ ദിവസവും മീഡിയം മാറ്റുക, 5-ാം ദിവസം പ്രായപൂർത്തിയാകാത്ത DC-കൾ നേടുക; ആറാം ദിവസം, മനുഷ്യ പെരിഫറൽ ബ്ലഡ് മോണോ ന്യൂക്ലിയർ സെല്ലുകളിൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ ഡിസികളെ പ്രേരിപ്പിക്കുന്നതിനുള്ള കൾച്ചർ പ്രോട്ടോക്കോൾ എന്ന നിലയിൽ ഗ്രൂപ്പിംഗ് അനുസരിച്ച് തുല്യ അളവിലുള്ള പിബിഎസ്, പിഎഫ്‌സി, എൽപിഎസ് എന്നിവ കൂട്ടിച്ചേർക്കുകയും 24 മണിക്കൂർ സംസ്‌കരിക്കുകയും ചെയ്തു.

പ്രകൃതിദത്ത ഉൽപന്നങ്ങളിൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ പോളിസാക്രറൈഡുകൾക്ക് കുറഞ്ഞ വിഷാംശം, ഇമ്മ്യൂണോസ്റ്റിമുലൻ്റുകൾ എന്ന നിലയിൽ കുറഞ്ഞ ചെലവ് എന്നിവയുടെ ഗുണങ്ങളുണ്ട്. പ്രാഥമിക പരീക്ഷണങ്ങൾക്ക് ശേഷം, വിട്രോയിൽ പ്രേരിപ്പിച്ച ഹ്യൂമൻ പെരിഫറൽ ബ്ലഡ് മോണോ ന്യൂക്ലിയർ സെല്ലിൽ നിന്നുള്ള ഡിസി സെല്ലുകളുടെ ഉപരിതലത്തിൽ പക്വതയുള്ള CD83 മാർക്കറിനെ PFC ഗണ്യമായി വർദ്ധിപ്പിക്കുമെന്ന് ഞങ്ങളുടെ ഗവേഷണ സംഘം കണ്ടെത്തി. ഫ്ലോ സൈറ്റോമെട്രി ഫലങ്ങൾ കാണിക്കുന്നത്, 24 മണിക്കൂർ 10 μg/mL സാന്ദ്രതയിൽ PFC ഇടപെടൽ, DC- കളുടെ ഉപരിതലത്തിൽ മുതിർന്ന മാർക്കർ CD83 ൻ്റെ ഏറ്റവും ഉയർന്ന പ്രകടനത്തിന് കാരണമായി, ഇത് DC-കൾ ഒരു മുതിർന്ന അവസ്ഥയിൽ പ്രവേശിച്ചുവെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു. അതിനാൽ, ഞങ്ങളുടെ ഗവേഷണ സംഘം ഇൻ വിട്രോ ഇൻഡക്ഷൻ ആൻഡ് ഇൻ്റർവെൻഷൻ പ്ലാൻ നിർണ്ണയിച്ചു. CD83, DC-കളുടെ ഉപരിതലത്തിലെ ഒരു പ്രധാന പക്വതയുള്ള ബയോമാർക്കറാണ്, അതേസമയം CD86 DC-കളുടെ ഉപരിതലത്തിൽ ഒരു പ്രധാന സഹ-ഉത്തേജക തന്മാത്രയായി വർത്തിക്കുന്നു, T കോശങ്ങൾ സജീവമാക്കുന്നതിനുള്ള രണ്ടാമത്തെ സിഗ്നലായി പ്രവർത്തിക്കുന്നു. രണ്ട് ബയോമാർക്കറുകൾ CD83, CD86 എന്നിവയുടെ മെച്ചപ്പെടുത്തിയ പദപ്രയോഗം സൂചിപ്പിക്കുന്നത് PFC ഹ്യൂമൻ പെരിഫറൽ ബ്ലഡ് മോണോ ന്യൂക്ലിയർ സെൽ-ഡൈരൈവ്ഡ് ഡിസികളുടെ പക്വതയെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നു എന്നാണ്, PFC ഒരേസമയം DC-കളുടെ ഉപരിതലത്തിൽ സൈറ്റോകൈനുകളുടെ സ്രവണം വർദ്ധിപ്പിക്കുമെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു. അതിനാൽ, ELISA ഉപയോഗിച്ച് DC-കൾ സ്രവിക്കുന്ന സൈറ്റോകൈനുകൾ IL-6, TNF-a, IL-10 എന്നിവയുടെ അളവ് ഈ പഠനം വിലയിരുത്തി. IL-10, DC-കളുടെ രോഗപ്രതിരോധ സഹിഷ്ണുതയുമായി അടുത്ത ബന്ധമുള്ളതാണ്, കൂടാതെ രോഗപ്രതിരോധ ശേഷിയുള്ള DC-കൾ ട്യൂമർ ചികിത്സയിൽ സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കാറുണ്ട്, അവയവം മാറ്റിവയ്ക്കലിൽ രോഗപ്രതിരോധ സഹിഷ്ണുതയ്ക്കുള്ള സാധ്യതയുള്ള ചികിത്സാ ആശയങ്ങൾ നൽകുന്നു; 1L-6 കുടുംബം സഹജവും അഡാപ്റ്റീവ് പ്രതിരോധശേഷി, ഹെമറ്റോപോയിസിസ്, ആൻറി-ഇൻഫ്ലമേറ്ററി ഇഫക്റ്റുകൾ എന്നിവയിൽ ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നു; Th17 സെല്ലുകളുടെ വ്യത്യാസത്തിൽ IL-6 ഉം TGF β ഉം സംയുക്തമായി പങ്കെടുക്കുന്നുവെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്ന പഠനങ്ങളുണ്ട്; ശരീരത്തെ ഒരു വൈറസ് ആക്രമിക്കുമ്പോൾ, വൈറസ് സജീവമാക്കുന്നതിന് പ്രതികരണമായി ഡിസികൾ നിർമ്മിക്കുന്ന ടിഎൻഎഫ്-എ ഡിസി പക്വതയെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നതിന് ഓട്ടോക്രൈൻ മെച്യൂറേഷൻ ഘടകമായി പ്രവർത്തിക്കുന്നു. TNF-a തടയുന്നത് DC-കളെ അപക്വമായ ഒരു ഘട്ടത്തിൽ എത്തിക്കുകയും അവയുടെ ആൻ്റിജൻ അവതരണ പ്രവർത്തനം പൂർണ്ണമായി നിർവഹിക്കുന്നതിൽ നിന്ന് തടയുകയും ചെയ്യും. ഈ പഠനത്തിലെ ELISA ഡാറ്റ മറ്റ് രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളെ അപേക്ഷിച്ച് PFC ഗ്രൂപ്പിലെ IL-10 ൻ്റെ സ്രവണം ഗണ്യമായി വർദ്ധിച്ചതായി കാണിക്കുന്നു, PFC ഡിസികളുടെ പ്രതിരോധശേഷി വർദ്ധിപ്പിക്കുമെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു; IL-6, TNF-a എന്നിവയുടെ വർദ്ധിച്ചുവരുന്ന സ്രവത്തിൻ്റെ അളവ് സൂചിപ്പിക്കുന്നത്, T സെൽ ഡിഫറൻഷ്യേഷൻ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നതിന് DC വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് PFC ന് സ്വാധീനം ചെലുത്താൻ കഴിയുമെന്നാണ്.