Полисахаридот од хлорела (PFC), како природен полисахарид, привлече големо внимание од научниците во последниве години поради неговите предности од ниска токсичност, ниски несакани ефекти и ефекти со широк спектар. Неговите функции во намалувањето на липидите во крвта, антитуморно, антиинфламаторно, против Паркинсонова болест, анти-стареење итн. се прелиминарно потврдени ин витро и ин виво експерименти. Сепак, сè уште постои празнина во истражувањето за PFC како човечки имунолошки модулатор.

Дендритичните клетки (DC) се најмоќните специјализирани клетки кои презентираат антиген во човечкото тело. Бројот на DC во човечкото тело е исклучително мал, а најчесто се користи модел на ин витро индукција со посредство на цитокин, имено DC од мононуклеарни клетки добиени од човечка периферна крв (moDCs). Ин витро индуцираниот DC модел за прв пат беше пријавен во 1992 година, кој е традиционален културен систем за DCs. Општо земено, тоа бара одгледување 6-7 дена. Клетките на коскената срцевина на глувчето може да се култивираат со фактор за стимулирање на колонијата на макрофагите на гранулоцити (GM-CSF) и интерлеукин (IL) -4 за да се добијат незрели DCs (PBS група). Цитокините се додаваат како зрели стимули и се култивираат 1-2 дена за да се добијат зрели DCs. Друга студија објави дека прочистените човечки ЦД14+клетки биле култивирани со интерферон – β (IFN – β) или IL-4 5 дена, а потоа култивирани со тумор некроза фактор-а (TNF-a) во текот на 2 дена за да се добијат DC со висока експресија на CD11c и CD83, кои имаат посилна способност да промовираат пролиферација на алогените CD4+T-клетки и CD8+T-клетки. Бројни полисахариди од природни извори имаат одлична имуномодулаторна активност, како што се полисахаридите од печурките шитаке, печурките од сплит жабрени, Yunzhi печурките и Poria cocos, кои се применуваат во клиничката пракса. Тие можат ефикасно да ја подобрат имунолошката функција на телото, да го зајакнат имунитетот и да послужат како помошни терапии за антитуморно лекување. Сепак, има неколку истражувачки извештаи за PFC како човечки имунолошки модулатор. Затоа, овој напис спроведува прелиминарно истражување за улогата и поврзаните механизми на PFC во промовирањето на созревањето на moDCs, со цел да се оцени потенцијалот на PFC како природен имунолошки модулатор.

Поради екстремно нискиот процент на DCs во човечките ткива и високата зачувување меѓу видовите помеѓу DCs на глувци и човечки DCs, со цел да се решат тешкотиите во истражувањето предизвикани од ниското производство на DC, ин витро индукционите модели на DCs добиени од мононуклеарни клетки на човечка периферна крв се изучувани, кои можат да добијат DC со добра имуногеност за краток временски период. Затоа, оваа студија го користеше традиционалниот метод за индуцирање човечки DCs in vitro: кокултивирање на rhGM CSF и rhIL-4 in vitro, менување на медиумот секој втор ден и добивање незрели DCs на 5-тиот ден; На 6-тиот ден, еднакви волумени на PBS, PFC и LPS беа додадени според групирањето и култивирани 24 часа како културен протокол за индуцирање на DC добиени од мононуклеарни клетки од човечка периферна крв.

Полисахаридите добиени од природни производи ги имаат предностите на ниска токсичност и ниска цена како имуностимуланти. По прелиминарните експерименти, нашата истражувачка група откри дека PFC значително го подобрува зрелиот маркер CD83 на површината на DC-клетки добиени од мононуклеарни клетки од човечка периферна крв, индуцирани in vitro. Резултатите од цитометријата на проток покажаа дека интервенцијата на PFC во концентрација од 10 μg/mL во текот на 24 часа резултираше со врвна експресија на зрелиот маркер CD83 на површината на DCs, што укажува дека DCs влегле во зрела состојба. Затоа, нашата истражувачка група го утврди планот за ин витро индукција и интервенција. CD83 е важен зрел биомаркер на површината на DCs, додека CD86 служи како важна костимулативна молекула на површината на DCs, делувајќи како втор сигнал за активирање на Т-клетките. Засилената експресија на два биомаркери CD83 и CD86 покажува дека PFC го промовира созревањето на човечка периферна крв од мононуклеарни клетки добиени од DC, што сугерира дека PFC може истовремено да го зголеми нивото на секреција на цитокините на површината на DCs. Затоа, оваа студија ги евалуираше нивоата на цитокините IL-6, TNF-a и IL-10 секретирани од DCs користејќи ELISA. IL-10 е тесно поврзан со имунолошката толеранција на DC, а DC со имунолошка толеранција најчесто се користат во третманот на туморот, обезбедувајќи потенцијални терапевтски идеи за имунолошка толеранција при трансплантација на органи; Семејството 1L-6 игра важна улога во вродениот и адаптивниот имунитет, хематопоезата и антиинфламаторните ефекти; Постојат студии кои покажуваат дека IL-6 и TGF β заеднички учествуваат во диференцијацијата на Th17 клетките; Кога телото е нападнато од вирус, TNF-a произведен од DC како одговор на активирањето на вирусот делува како фактор на автокрино созревање за да го промовира созревањето на DC. Блокирањето на TNF-a ќе ги стави DCs во незрела фаза, спречувајќи ги целосно да ја вршат својата функција на презентација на антиген. Податоците ELISA во оваа студија покажаа дека нивото на секреција на IL-10 во групата PFC беше значително зголемено во споредба со другите две групи, што укажува дека PFC ја подобрува имунолошката толеранција на DCs; Зголемените нивоа на секреција на IL-6 и TNF-a сугерираат дека PFC може да има ефект на подобрување на DC за промовирање на диференцијација на Т-клетките.