Chlorella polisacharidas (PFC), kaip natūralus polisacharidas, pastaraisiais metais sulaukė didelio mokslininkų dėmesio dėl mažo toksiškumo, mažo šalutinio poveikio ir plataus spektro poveikio. Jo funkcijos mažinant lipidų kiekį kraujyje, priešnavikinės, priešuždegiminės, Parkinsono ligos, senėjimą stabdančios ir kt. buvo preliminariai patvirtintos in vitro ir in vivo eksperimentais. Tačiau PFC, kaip žmogaus imuninės sistemos moduliatoriaus, tyrimuose vis dar yra spragų.

Dendritinės ląstelės (DC) yra galingiausios specializuotos antigeną pateikiančios ląstelės žmogaus kūne. DC skaičius žmogaus kūne yra labai mažas, todėl dažniausiai naudojamas citokinų sukeltas in vitro indukcijos modelis, būtent žmogaus periferinio kraujo mononuklearinių ląstelių kilmės DC (moDC). Pirmą kartą apie in vitro sukeltą DC modelį buvo pranešta 1992 m., Tai yra tradicinė DC kultūros sistema. Paprastai jį reikia auginti 6–7 dienas. Pelės kaulų čiulpų ląstelės gali būti kultivuojamos su granulocitų makrofagų kolonijas stimuliuojančiu faktoriumi (GM-CSF) ir interleukinu (IL) -4, siekiant gauti nesubrendusius DC (PBS grupė). Citokinai pridedami kaip subrendę dirgikliai ir kultivuojami 1–2 dienas, kad būtų gauti subrendę DC. Kitas tyrimas parodė, kad išgrynintos žmogaus CD14+ ląstelės buvo kultivuojamos su interferonu – β (IFN – β) arba IL-4 5 dienas, o po to 2 dienas buvo kultivuojamos su naviko nekrozės faktoriumi-a (TNF-a), kad gautų DC su dideliu kiekiu. CD11c ir CD83 ekspresija, kurios turi stipresnį gebėjimą skatinti alogeninių CD4+T ląstelių ir CD8+T ląstelių dauginimąsi. Daugybė polisacharidų iš natūralių šaltinių turi puikų imunomoduliacinį aktyvumą, pavyzdžiui, polisacharidai iš šitake grybų, suskilusių žiaunų grybų, Yunzhi grybų ir Poria kokosų, kurie buvo taikomi klinikinėje praktikoje. Jie gali veiksmingai pagerinti organizmo imuninę funkciją, sustiprinti imunitetą ir būti kaip adjuvantinė terapija priešnavikiniam gydymui. Tačiau yra keletas tyrimų ataskaitų apie PFC kaip žmogaus imuninį moduliatorių. Todėl šiame straipsnyje atliekami preliminarūs PFC vaidmens ir susijusių mechanizmų tyrimai skatinant moDC brendimą, siekiant įvertinti PFC, kaip natūralaus imuninio moduliatoriaus, potencialą.

Dėl itin mažos DC dalies žmogaus audiniuose ir didelio skirtingų rūšių išsaugojimo tarp pelių DC ir žmogaus DC, siekiant išspręsti tyrimų sunkumus, kylančius dėl mažos nuolatinės srovės gamybos, in vitro indukcijos modeliai DC, gauti iš žmogaus periferinio kraujo mononuklearinių ląstelių. buvo ištirti, kurie per trumpą laiką gali gauti gero imunogeniškumo DC. Todėl šiame tyrime buvo naudojamas tradicinis žmogaus DC indukavimo metodas in vitro: rhGM CSF ir rhIL-4 kartu kultivavimas in vitro, terpės keitimas kas antrą dieną ir nesubrendusių DC gavimas 5 dieną; 6-ą dieną buvo pridėta vienoda tūrio PBS, PFC ir LPS pagal grupavimą ir kultivuojama 24 valandas kaip kultūros protokolas, skirtas DC, gautam iš žmogaus periferinio kraujo mononuklearinių ląstelių, sukelti.

Polisacharidai, gauti iš natūralių produktų, turi mažo toksiškumo ir mažos kainos imunostimuliatorių pranašumus. Po preliminarių eksperimentų mūsų tyrimų grupė nustatė, kad PFC žymiai padidina brandų žymeklį CD83 žmogaus periferinio kraujo mononuklearinių ląstelių DC ląstelių, indukuotų in vitro, paviršiuje. Srauto citometrijos rezultatai parodė, kad PFC intervencija, kai koncentracija 10 μg / ml 24 valandas, lėmė didžiausią subrendusio žymeklio CD83 ekspresiją DC paviršiuje, o tai rodo, kad DC pateko į brandžią būseną. Todėl mūsų tyrimų grupė nustatė in vitro indukcijos ir intervencijos planą. CD83 yra svarbus subrendęs biomarkeris DC paviršiuje, o CD86 tarnauja kaip svarbi stimuliuojanti molekulė DC paviršiuje, veikdama kaip antrasis signalas aktyvuojant T ląsteles. Padidėjusi dviejų biomarkerių CD83 ir CD86 ekspresija rodo, kad PFC skatina žmogaus periferinio kraujo mononuklearinių ląstelių kilmės DC brendimą, o tai rodo, kad PFC vienu metu gali padidinti citokinų sekrecijos lygį DC paviršiuje. Todėl šis tyrimas įvertino citokinų IL-6, TNF-a ir IL-10, kuriuos išskiria DC, lygius naudojant ELISA. IL-10 yra glaudžiai susijęs su DC imunine tolerancija, o imuninę toleranciją turintys DC dažniausiai naudojami navikų gydymui, suteikiant potencialių terapinių idėjų imuninei tolerancijai transplantuojant organus; 1L-6 šeima atlieka svarbų vaidmenį įgimtam ir adaptyviam imunitetui, kraujodaros ir priešuždegiminiam poveikiui; Yra tyrimų, rodančių, kad IL-6 ir TGF β kartu dalyvauja Th17 ląstelių diferenciacijoje; Kai organizmą užpuola virusas, TNF-a, kurį gamina DC, reaguodamas į viruso aktyvavimą, veikia kaip autokrininis brendimo faktorius, skatinantis DC brendimą. Užblokavus TNF-a, DC bus nesubrendusioje stadijoje, todėl jie negalės visiškai atlikti savo antigeno pateikimo funkcijos. Šio tyrimo ELISA duomenys parodė, kad IL-10 sekrecijos lygis PFC grupėje buvo žymiai padidėjęs, palyginti su kitomis dviem grupėmis, o tai rodo, kad PFC padidina DC imuninę toleranciją; Didėjantis IL-6 ir TNF-a sekrecijos lygis rodo, kad PFC gali sustiprinti DC ir skatinti T ląstelių diferenciaciją.