클로렐라 유래 다당류(PFC)는 천연 다당류로서 낮은 독성, 낮은 부작용, 광범위한 효과 등의 장점으로 최근 학자들로부터 많은 주목을 받고 있습니다. 혈중 지질 저하, 항종양, 항염증, 항파킨슨병, 노화 방지 등의 기능은 시험관 내 및 생체 내 실험에서 사전 검증되었습니다. 그러나 인간 면역 조절제로서 PFC에 대한 연구에는 여전히 공백이 있습니다.

수지상 세포(DC)는 인체에서 가장 강력한 특수 항원 제시 세포입니다. 인체 내 DC의 수는 극히 적으며 사이토카인 매개 체외 유도 모델, 즉 인간 말초 혈액 단핵 세포 유래 DC(moDC)가 일반적으로 사용됩니다. 시험관 내 유도 DC 모델은 1992년에 처음 보고되었으며, 이는 DC의 전통적인 배양 시스템입니다. 일반적으로 6~7일간 재배가 필요합니다. 마우스 골수 세포는 과립구 대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF) 및 인터루킨(IL)-4와 함께 배양하여 미성숙 DC(PBS 그룹)를 얻을 수 있습니다. 사이토카인을 성숙한 자극으로 첨가하고 1-2일 동안 배양하여 성숙한 DC를 얻습니다. 또 다른 연구에서는 정제된 인간 CD14+ 세포를 인터페론 – β(IFN – β) 또는 IL-4와 함께 5일 동안 배양한 다음 종양 괴사 인자-α(TNF-a)와 함께 2일 동안 배양하여 높은 수준의 DC를 얻었다고 보고했습니다. 동종 CD4+T 세포와 CD8+T 세포의 증식을 촉진하는 능력이 더 강한 CD11c와 CD83의 발현. 표고버섯, 쪼개진 아가미버섯, 윤지버섯, 복령버섯 등의 다당류 등 천연 유래의 수많은 다당류는 우수한 면역조절 활성을 갖고 있어 임상에 적용되고 있습니다. 이는 신체의 면역 기능을 효과적으로 향상시키고, 면역력을 강화하며, 항종양 치료를 위한 보조 요법의 역할을 할 수 있습니다. 그러나 인간 면역 조절제로서 PFC에 대한 연구 보고서는 거의 없습니다. 따라서 이 기사에서는 자연 면역 조절제로서 PFC의 잠재력을 평가하기 위해 moDC의 성숙을 촉진하는 데 있어 PFC의 역할 및 관련 메커니즘에 대한 예비 연구를 수행합니다.

인간 조직에서 DC의 비율이 극히 낮고 마우스 DC와 인간 DC 사이의 높은 종간 보존으로 인해 낮은 DC 생산으로 인한 연구 어려움을 해결하기 위해 인간 말초 혈액 단핵 세포에서 유래된 DC의 시험관 내 유도 모델 단기간 내에 우수한 면역원성을 갖는 DC를 얻을 수 있다는 연구 결과가 나왔다. 따라서 이 연구에서는 시험관 내에서 인간 DC를 유도하는 전통적인 방법을 사용했습니다. 시험관 내에서 rhGM CSF와 rhIL-4를 공동 배양하고 격일로 배지를 변경하고 5일째에 미성숙 DC를 얻습니다. 6일째에는 인간 말초혈액 단핵세포 유래 수지상세포를 유도하기 위한 배양 프로토콜로 동량의 PBS, PFC, LPS를 그룹화에 따라 첨가하고 24시간 동안 배양하였다.

천연물에서 유래한 다당류는 면역자극제로서 독성이 낮고 가격이 저렴한 장점이 있다. 예비 실험 후, 우리 연구 그룹은 PFC가 시험관 내에서 유도된 인간 말초 혈액 단핵 세포 유래 DC 세포 표면의 성숙한 마커 CD83을 크게 향상시키는 것을 발견했습니다. 유세포 분석 결과에 따르면 24시간 동안 10μg/mL 농도의 PFC 개입으로 인해 DC 표면에서 성숙 마커 CD83이 최고로 발현되었으며 이는 DC가 성숙 상태에 진입했음을 나타냅니다. 따라서 우리 연구팀은 체외 유도 및 중재 계획을 결정했습니다. CD83은 DC 표면의 중요한 성숙 바이오마커인 반면, CD86은 DC 표면의 중요한 보조자극 분자 역할을 하며 T 세포 활성화를 위한 두 번째 신호로 작용합니다. 두 가지 바이오마커 CD83과 CD86의 향상된 발현은 PFC가 인간 말초 혈액 단핵 세포 유래 DC의 성숙을 촉진한다는 것을 나타내며, 이는 PFC가 DC 표면의 사이토카인 분비 수준을 동시에 증가시킬 수 있음을 시사합니다. 따라서 본 연구에서는 ELISA를 사용하여 DC에서 분비되는 사이토카인 IL-6, TNF-α 및 IL-10의 수준을 평가했습니다. IL-10은 DC의 면역 관용과 밀접하게 관련되어 있으며, 면역 관용을 갖는 DC는 종양 치료에 일반적으로 사용되어 장기 이식에서 면역 관용에 대한 잠재적인 치료 아이디어를 제공합니다. 1L-6 계열은 선천성 및 적응성 면역, 조혈 및 항염증 효과에서 중요한 역할을 합니다. IL-6과 TGF β가 Th17 세포의 분화에 공동으로 참여한다는 연구가 있습니다. 신체에 바이러스가 침입하면 바이러스 활성화에 반응하여 DC에서 생성된 TNF-a가 자가분비 성숙 인자로 작용하여 DC 성숙을 촉진합니다. TNF-α를 차단하면 DC가 미성숙 단계에 들어가 항원 제시 기능을 완전히 발휘하지 못하게 됩니다. 이 연구의 ELISA 데이터는 PFC 그룹의 IL-10 분비 수준이 다른 두 그룹에 비해 크게 증가한 것으로 나타났으며, 이는 PFC가 DC의 면역 내성을 향상시킨다는 것을 나타냅니다. IL-6 및 TNF-α의 분비 수준 증가는 PFC가 DC를 강화하여 T 세포 분화를 촉진하는 효과가 있을 수 있음을 시사합니다.