クロレラ由来多糖類（PFC）は天然多糖類であり、低毒性、低副作用、広範囲な効果などの利点から、近年学者の間で大きな注目を集めています。血中脂質の低下、抗腫瘍、抗炎症、抗パーキンソン病、抗老化などにおけるその機能は、インビトロおよびインビボ実験で予備的に検証されています。しかし、ヒトの免疫調節因子としての PFC に関する研究にはまだギャップがあります。

樹状細胞 (DC) は、人体内で最も強力な特殊な抗原提示細胞です。人体内の DC の数は非常に少ないため、サイトカインを介した in vitro 誘導モデル、つまりヒト末梢血単核球由来 DC (moDC) が一般的に使用されます。 in vitro 誘導 DC モデルは 1992 年に初めて報告されました。これは DC の伝統的な培養システムです。通常、6〜7日間の栽培が必要です。マウス骨髄細胞を顆粒球マクロファージコロニー刺激因子 (GM-CSF) およびインターロイキン (IL) -4 とともに培養すると、未成熟 DC (PBS グループ) が得られます。サイトカインを成熟刺激として加え、1 ～ 2 日間培養して成熟 DC を取得します。別の研究では、精製ヒト CD14+ 細胞をインターフェロン – β (IFN – β) または IL-4 とともに 5 日間培養し、その後腫瘍壊死因子 a (TNF-a) とともに 2 日間培養して、高濃度の DC を取得したと報告しています。 CD11c および CD83 の発現。これらは同種異系 CD4+T 細胞および CD8+T 細胞の増殖を促進する強力な能力を持っています。シイタケ、割れ鰓茸、雲芝茸、ポリアココス由来の多糖類など、天然由来の多くの多糖類には優れた免疫調節活性があり、臨床現場で応用されています。これらは体の免疫機能を効果的に改善し、免疫力を強化し、抗腫瘍治療の補助療法として役立ちます。しかし、ヒトの免疫調節因子としての PFC に関する研究報告はほとんどありません。したがって、この記事では、自然免疫調節因子としての PFC の可能性を評価するために、moDC の成熟促進における PFC の役割と関連メカニズムに関する予備研究を実施します。

ヒト組織における DC の割合が極めて低く、マウス DC とヒト DC の間の種間保存性が高いため、DC 産生の低さに起因する研究上の困難を解決するために、ヒト末梢血単核球由来の DC の in vitro 誘導モデルが開発されました。免疫原性の良好なDCを短期間で得ることができる方法が研究されている。したがって、この研究では、in vitro でヒト DC を誘導する従来の方法を使用しました。つまり、rhGM CSF と rhIL-4 を in vitro で共培養し、培地を 1 日おきに交換し、5 日目に未成熟 DC を取得しました。 ６日目に、ヒト末梢血単核球由来のＤＣを誘導するための培養プロトコールとして、グループに応じて等量のＰＢＳ、ＰＦＣ、ＬＰＳを添加し、２４時間培養した。

天然物由来の多糖類は免疫賦活剤として低毒性、低コストという利点を持っています。予備実験の後、我々の研究グループは、PFCがin vitroで誘導されたヒト末梢血単核球由来DC細胞の表面上の成熟マーカーCD83を有意に増強することを発見した。フローサイトメトリーの結果は、10μg/mLの濃度で24時間のPFC介入により、DCの表面上で成熟マーカーCD83のピーク発現がもたらされ、DCが成熟状態に入ったことを示した。したがって、私たちの研究グループは、in vitro での導入および介入計画を決定しました。 CD83 は DC 表面の重要な成熟バイオマーカーであり、CD86 は DC 表面の重要な共刺激分子として機能し、T 細胞を活性化するための 2 番目のシグナルとして機能します。 2 つのバイオマーカー CD83 および CD86 の発現の増強は、PFC がヒト末梢血単核球由来 DC の成熟を促進することを示しており、PFC が DC 表面のサイトカインの分泌レベルを同時に増加させる可能性があることを示唆しています。したがって、この研究では、ELISA を使用して DC によって分泌されるサイトカイン IL-6、TNF-α、および IL-10 のレベルを評価しました。 IL-10はDCの免疫寛容と密接に関連しており、免疫寛容を備えたDCは腫瘍治療に一般的に使用されており、臓器移植における免疫寛容の潜在的な治療アイデアを提供します。 1L-6 ファミリーは、自然免疫および適応免疫、造血、および抗炎症効果において重要な役割を果たします。 IL-6 と TGF β が共同して Th17 細胞の分化に関与していることを示す研究があります。身体がウイルスに侵入すると、ウイルスの活性化に応答して DC によって産生される TNF-α が自己分泌成熟因子として作用し、DC の成熟を促進します。 TNF-αをブロックするとDCは未成熟段階となり、抗原提示機能を十分に発揮できなくなります。この研究の ELISA データは、PFC グループの IL-10 分泌レベルが他の 2 つのグループと比較して有意に増加していることを示し、PFC が DC の免疫寛容を強化することを示しています。 IL-6およびTNF-αの分泌レベルの増加は、PFCがDCを増強してT細胞分化を促進する効果を有する可能性を示唆している。