פוליסכריד מכלורלה (PFC), כרב סוכר טבעי, משך בשנים האחרונות תשומת לב רבה מצד חוקרים בשל יתרונותיו של רעילות נמוכה, תופעות לוואי נמוכות והשפעות רחבות טווח. תפקידיו בהורדת שומנים בדם, אנטי גידולים, אנטי דלקתיים, אנטי פרקינסון, אנטי אייג'ינג וכו' אושרו מראש ניסויים במבחנה ו-in vivo. עם זאת, עדיין יש פער במחקר על PFC כמאפנן חיסוני אנושי.

תאים דנדריטים (DCs) הם התאים החזקים ביותר המציגים אנטיגן בגוף האדם. מספר ה-DCs בגוף האדם קטן ביותר, ושימוש נפוץ במודל אינדוקציה במבחנה המתווך באמצעות ציטוקינים, דהיינו DCs (moDCs) שמקורם בתאים מונו-גרעיניים מדם היקפי אנושי. מודל ה-DC המושרה במבחנה דווח לראשונה בשנת 1992, שהיא מערכת התרבות המסורתית עבור DCs. בדרך כלל, זה דורש טיפוח במשך 6-7 ימים. ניתן לגדל תאי מח עצם של עכברים עם גורם מגרה של מושבה גרנולוציטים מקרופאגים (GM-CSF) ואינטרלוקין (IL) -4 כדי להשיג DCs לא בשלים (קבוצת PBS). ציטוקינים מתווספים כגירויים בוגרים ומתורבתים במשך 1-2 ימים כדי להשיג DCs בוגרים. מחקר אחר דיווח שתאי CD14+ אנושיים מטוהרים תורבו עם אינטרפרון - β (IFN - β) או IL-4 למשך 5 ימים, ולאחר מכן תורבו עם גורם נמק גידול-a (TNF-a) למשך יומיים כדי להשיג DCs עם גבוה ביטוי של CD11c ו-CD83, בעלי יכולת חזקה יותר לקדם שגשוג של תאי CD4+T אלוגניים ותאי CD8+T. לפוליסכרידים רבים ממקורות טבעיים יש פעילות אימונומודולטורית מצוינת, כגון פוליסכרידים מפטריות שיטאקי, פטריות זימים מפוצלות, פטריות יונז'י ו-Poria cocos, שיושמו בפרקטיקה הקלינית. הם יכולים לשפר ביעילות את תפקוד החיסון של הגוף, לשפר חסינות ולשמש כטיפולים משלימים לטיפול נגד גידולים. עם זאת, ישנם מעט דוחות מחקריים על PFC כמאפנן חיסוני אנושי. לכן, מאמר זה עורך מחקר ראשוני על התפקיד והמנגנונים הקשורים ל-PFC בקידום התבגרות של moDCs, על מנת להעריך את הפוטנציאל של PFC כמאפנן חיסוני טבעי.

בשל השיעור הנמוך ביותר של DCs ברקמות אנושיות והשימור הגבוה בין המינים בין DCs עכברים ו DCs אנושיים, על מנת לפתור את הקשיים המחקריים הנגרמים מייצור DC נמוך, מודלים אינדוקציה במבחנה של DCs שמקורם בתאים חד-גרעיניים בדם היקפיים אנושיים נחקרו, שיכולים להשיג DCs עם אימונוגניות טובה בפרק זמן קצר. לכן, מחקר זה השתמש בשיטה המסורתית של השראת DCs אנושיים במבחנה: תרבית משותף של rhGM CSF ו-rhIL-4 במבחנה, החלפת המדיום כל יומיים והשגת DCs לא בשלים ביום החמישי; ביום השישי, נוספו נפחים שווים של PBS, PFC ו-LPS על פי קיבוץ ותופחו במשך 24 שעות כפרוטוקול התרבית להשראת DCs שמקורם בתאים חד-גרעיניים בדם היקפיים אנושיים.

לפוליסכרידים המופקים ממוצרים טבעיים יש את היתרונות של רעילות נמוכה ועלות נמוכה כממריצים חיסוניים. לאחר ניסויים ראשוניים, קבוצת המחקר שלנו מצאה ש-PFC משפר באופן משמעותי את הסמן הבוגר CD83 על פני השטח של תאי DC שמקורם בתאים מונו-גרעיניים בדם היקפי אנושיים המושרים במבחנה. תוצאות ציטומטריית זרימה הראו שהתערבות PFC בריכוז של 10 מיקרוגרם/מ"ל למשך 24 שעות הביאה לביטוי שיא של הסמן הבוגר CD83 על פני השטח של DCs, מה שמצביע על כך ש-DCs נכנסו למצב בוגר. לכן, קבוצת המחקר שלנו קבעה את תוכנית האינדוקציה וההתערבות במבחנה. CD83 הוא סמן ביולוגי בוגר חשוב על פני השטח של DCs, בעוד CD86 משמש כמולקולה מעוררת משותפת חשובה על פני השטח של DCs, הפועלת כאות השני להפעלת תאי T. הביטוי המוגבר של שני סמנים ביולוגיים CD83 ו-CD86 מצביע על כך ש-PFC מקדם את ההבשלה של DCs שמקורם בתאים מונו-גרעיניים מדם היקפי אנושיים, מה שמצביע על כך ש-PFC עשוי להגביר בו-זמנית את רמת ההפרשה של ציטוקינים על פני השטח של DCs. לכן, מחקר זה העריך את רמות הציטוקינים IL-6, TNF-a ו-IL-10 המופרשים על ידי DCs באמצעות ELISA. IL-10 קשור קשר הדוק לסבילות החיסונית של DCs, ו-DCs עם סובלנות חיסונית משמשים בדרך כלל בטיפול בגידול, ומספקים רעיונות טיפוליים פוטנציאליים לסובלנות חיסונית בהשתלת איברים; משפחת 1L-6 ממלאת תפקיד חשוב בחסינות מולדת וסתגלנית, בהמטופואזה והשפעות אנטי דלקתיות; ישנם מחקרים המצביעים על כך ש-IL-6 ו-TGF β משתתפים במשותף בהתמיינות של תאי Th17; כאשר לגוף פולש וירוס, ה-TNF-a המיוצר על ידי DCs בתגובה להפעלת הנגיף פועל כגורם התבגרות אוטוקריני לקידום התבגרות DC. חסימת TNF-a תכניס את ה-DCs לשלב לא בוגר, ימנע מהם להפעיל באופן מלא את תפקוד הצגת האנטיגן שלהם. נתוני ה-ELISA במחקר זה הראו שרמת ההפרשה של IL-10 בקבוצת ה-PFC עלתה משמעותית בהשוואה לשתי הקבוצות האחרות, מה שמצביע על כך ש-PFC משפר את הסבילות החיסונית של DCs; רמות ההפרשה הגוברת של IL-6 ו-TNF-a מצביעות על כך של-PFC עשויה להיות השפעה של שיפור DC כדי לקדם התמיינות תאי T.