Polisaharid iz klorele (PFC), kao prirodni polisaharid, privukao je veliku pažnju znanstvenika posljednjih godina zbog svojih prednosti niske toksičnosti, niskih nuspojava i širokog spektra djelovanja. Njegove funkcije u snižavanju lipida u krvi, protiv tumora, protiv upale, protiv Parkinsonove bolesti, protiv starenja, itd. preliminarno su potvrđene in vitro i in vivo eksperimentima. Međutim, još uvijek postoji praznina u istraživanju PFC-a kao ljudskog imunološkog modulatora.

Dendritičke stanice (DC) najsnažnije su specijalizirane stanice za predstavljanje antigena u ljudskom tijelu. Broj DC-a u ljudskom tijelu iznimno je malen, a obično se koristi model in vitro indukcije posredovan citokinima, naime DC-i izvedeni iz mononuklearnih stanica periferne krvi (moDCs). In vitro inducirani DC model prvi put je prijavljen 1992., što je tradicionalni sustav kulture za DC. Općenito, zahtijeva uzgoj 6-7 dana. Stanice koštane srži miša mogu se uzgajati s faktorom stimulacije kolonija granulocitnih makrofaga (GM-CSF) i interleukinom (IL) -4 da bi se dobile nezrele DC (PBS skupina). Citokini se dodaju kao zreli podražaji i uzgajaju 1-2 dana da se dobiju zreli DC. Druga je studija objavila da su pročišćene ljudske CD14+ stanice uzgajane s interferonom – β (IFN – β) ili IL-4 tijekom 5 dana, a zatim uzgajane s faktorom nekroze tumora-a (TNF-a) tijekom 2 dana kako bi se dobile DC s visokim ekspresiju CD11c i CD83, koji imaju jaču sposobnost poticanja proliferacije alogenih CD4+T stanica i CD8+T stanica. Brojni polisaharidi iz prirodnih izvora imaju izvrsno imunomodulatorno djelovanje, kao što su polisaharidi iz shiitake gljiva, split gill gljiva, Yunzhi gljiva i Poria cocos, koji su primijenjeni u kliničkoj praksi. Oni mogu učinkovito poboljšati tjelesnu imunološku funkciju, ojačati imunitet i poslužiti kao pomoćna terapija za liječenje tumora. Međutim, malo je izvješća o istraživanju PFC-a kao modulatora ljudskog imuniteta. Stoga ovaj članak provodi preliminarno istraživanje o ulozi i povezanim mehanizmima PFC-a u poticanju sazrijevanja moDC-a, kako bi se procijenio potencijal PFC-a kao prirodnog imunološkog modulatora.

Zbog iznimno niskog udjela DC-a u ljudskim tkivima i visoke međuvrstske očuvanosti između mišjih DC-a i ljudskih DC-a, kako bi se riješile istraživačke poteškoće uzrokovane niskom proizvodnjom DC-a, in vitro modeli indukcije DC-a izvedeni iz mononuklearnih stanica periferne krvi čovjeka koji mogu dobiti DC s dobrom imunogenošću u kratkom vremenskom razdoblju. Stoga je ova studija koristila tradicionalnu metodu indukcije ljudskih DC in vitro: zajedničko uzgoj rhGM CSF i rhIL-4 in vitro, mijenjanje medija svaki drugi dan i dobivanje nezrelih DC 5. dana; Šestog dana dodani su jednaki volumeni PBS-a, PFC-a i LPS-a prema grupiranju i uzgajani 24 sata kao protokol kulture za induciranje DC-a dobivenih iz mononuklearnih stanica ljudske periferne krvi.

Polisaharidi dobiveni iz prirodnih proizvoda imaju prednosti niske toksičnosti i niske cijene kao imunostimulansi. Nakon preliminarnih eksperimenata, naša istraživačka skupina otkrila je da PFC značajno pojačava zreli marker CD83 na površini mononuklearnih stanica ljudske periferne krvi DC stanica induciranih in vitro. Rezultati protočne citometrije pokazali su da je PFC intervencija u koncentraciji od 10 μg/mL tijekom 24 sata rezultirala vršnom ekspresijom zrelog markera CD83 na površini DC-a, što ukazuje da su DC-i ušli u zrelo stanje. Stoga je naša istraživačka skupina odredila in vitro indukciju i plan intervencije. CD83 je važan zreli biomarker na površini DC, dok CD86 služi kao važna kostimulacijska molekula na površini DC, djelujući kao drugi signal za aktiviranje T stanica. Pojačana ekspresija dvaju biomarkera CD83 i CD86 ukazuje na to da PFC potiče sazrijevanje DC-a izvedenih iz mononuklearnih stanica periferne krvi, sugerirajući da PFC može istodobno povećati razinu izlučivanja citokina na površini DC-a. Stoga je ova studija procijenila razine citokina IL-6, TNF-a i IL-10 koje luče DC pomoću ELISA-e. IL-10 je usko povezan s imunološkom tolerancijom DC-a, a DC-i s imunološkom tolerancijom obično se koriste u liječenju tumora, pružajući potencijalne terapeutske ideje za imunološku toleranciju kod transplantacije organa; Porodica 1L-6 igra važnu ulogu u urođenom i adaptivnom imunitetu, hematopoezi i protuupalnim učincima; Postoje studije koje pokazuju da IL-6 i TGF β zajedno sudjeluju u diferencijaciji Th17 stanica; Kada je tijelo napadnuto virusom, TNF-a koji proizvode DC kao odgovor na aktivaciju virusa djeluje kao autokrini čimbenik sazrijevanja za promicanje sazrijevanja DC-a. Blokiranje TNF-a će staviti DC u nezreli stadij, sprječavajući ih da u potpunosti iskoriste svoju funkciju predstavljanja antigena. Podaci ELISA-e u ovoj studiji pokazali su da je razina lučenja IL-10 u PFC skupini značajno povećana u usporedbi s druge dvije skupine, što ukazuje da PFC povećava imunološku toleranciju na DC; Povećane razine izlučivanja IL-6 i TNF-a sugeriraju da bi PFC mogao imati učinak povećanja DC za poticanje diferencijacije T stanica.