O polisacárido de Chlorella (PFC), como polisacárido natural, atraeu moita atención dos estudosos nos últimos anos debido ás súas vantaxes de baixa toxicidade, baixos efectos secundarios e efectos de amplo espectro. As súas funcións na baixada de lípidos no sangue, antitumorales, antiinflamatorias, anti Parkinson, antienvellecemento, etc. foron validadas previamente en experimentos in vitro e in vivo. Non obstante, aínda hai unha brecha na investigación sobre PFC como modulador inmunolóxico humano.

As células dendríticas (DC) son as células presentadoras de antíxenos especializadas máis poderosas do corpo humano. O número de DC no corpo humano é extremadamente pequeno, e úsase habitualmente un modelo de indución in vitro mediado por citocinas, é dicir, DCs derivadas de células mononucleares de sangue periférico humano (moDC). O modelo de DC inducido in vitro informouse por primeira vez en 1992, que é o sistema de cultivo tradicional para DC. Xeralmente, require cultivo durante 6-7 días. As células de medula ósea de rato pódense cultivar con factor estimulante de colonias de macrófagos de granulocitos (GM-CSF) e interleucina (IL) -4 para obter DCs inmaduras (grupo PBS). As citocinas engádense como estímulos maduros e cultívanse durante 1-2 días para obter DC maduras. Outro estudo informou de que as células CD14+ humanas purificadas foron cultivadas con interferón - β (IFN - β) ou IL-4 durante 5 días, e despois cultivadas con factor de necrose tumoral-a (TNF-a) durante 2 días para obter DCs con expresión de CD11c e CD83, que teñen unha capacidade máis forte para promover a proliferación de células T CD4+ aloxénicas e células T CD8+. Numerosos polisacáridos de fontes naturais teñen unha excelente actividade inmunomoduladora, como os polisacáridos de cogomelos shiitake, cogomelos de branquias divididas, cogomelos Yunzhi e cocos Poria, que foron aplicados na práctica clínica. Poden mellorar eficazmente a función inmunolóxica do corpo, mellorar a inmunidade e servir como terapias adxuvantes para o tratamento antitumoral. Non obstante, hai poucos informes de investigación sobre PFC como modulador inmunitario humano. Polo tanto, este artigo realiza investigacións preliminares sobre o papel e os mecanismos relacionados da PFC na promoción da maduración dos moDC, co fin de avaliar o potencial da PFC como modulador inmune natural.

Debido á proporción extremadamente baixa de DC nos tecidos humanos e á alta conservación entre especies entre DC de rato e DC humana, para resolver as dificultades de investigación causadas pola baixa produción de DC, modelos de indución in vitro de DC derivados de células mononucleares de sangue periférico humano. foron estudados, que poden obter DC con boa inmunoxenicidade nun curto período de tempo. Polo tanto, este estudo utilizou o método tradicional de indución de DC humanas in vitro: co cultivo de rhGM CSF e rhIL-4 in vitro, cambiando o medio cada dos días e obtendo DC inmaduros o 5º día; O 6º día, engadíronse volumes iguais de PBS, PFC e LPS segundo o agrupamento e cultiváronse durante 24 horas como protocolo de cultivo para inducir DC derivadas de células mononucleares de sangue periférico humano.

Os polisacáridos derivados de produtos naturais teñen as vantaxes de baixa toxicidade e baixo custo como inmunoestimulantes. Despois de experimentos preliminares, o noso grupo de investigación descubriu que a PFC mellora significativamente o marcador maduro CD83 na superficie das células DC derivadas de células mononucleares de sangue periférico humano inducidas in vitro. Os resultados da citometría de fluxo mostraron que a intervención de PFC a unha concentración de 10 μ g/mL durante 24 horas deu lugar a un pico de expresión do marcador maduro CD83 na superficie das DC, o que indica que as DC entraron nun estado maduro. Por iso, o noso grupo de investigación determinou o plan de indución e intervención in vitro. O CD83 é un biomarcador maduro importante na superficie das DC, mentres que o CD86 serve como unha importante molécula coestimuladora na superficie das DC, actuando como segundo sinal para activar as células T. A expresión mellorada de dous biomarcadores CD83 e CD86 indica que a PFC promove a maduración das DC derivadas de células mononucleares de sangue periférico humano, o que suxire que a PFC pode aumentar simultáneamente o nivel de secreción de citocinas na superficie das DC. Polo tanto, este estudo avaliou os niveis de citocinas IL-6, TNF-a e IL-10 secretadas polas DC mediante ELISA. A IL-10 está intimamente relacionada coa tolerancia inmune das DC, e as DC con tolerancia inmune úsanse habitualmente no tratamento de tumores, proporcionando posibles ideas terapéuticas para a tolerancia inmune no transplante de órganos; A familia 1L-6 xoga un papel importante na inmunidade innata e adaptativa, na hematopoiese e nos efectos antiinflamatorios; Hai estudos que indican que a IL-6 e o ​​TGF β participan conxuntamente na diferenciación das células Th17; Cando o corpo é invadido por un virus, o TNF-a producido polas DC en resposta á activación do virus actúa como un factor de maduración autocrino para promover a maduración das DC. O bloqueo do TNF-a poñerá aos DC nunha fase inmadura, impedindo que poidan exercer plenamente a súa función de presentación de antíxenos. Os datos ELISA deste estudo mostraron que o nivel de secreción de IL-10 no grupo PFC aumentou significativamente en comparación cos outros dous grupos, o que indica que PFC mellora a tolerancia inmune das DC; Os niveis de secreción crecentes de IL-6 e TNF-a suxiren que a PFC pode ter o efecto de potenciar as DC para promover a diferenciación das células T.