Chlorellasta peräisin oleva polysakkaridi (PFC) luonnollisena polysakkaridina on herättänyt paljon tutkijoiden huomiota viime vuosina, koska sen etuja ovat alhainen toksisuus, vähäiset sivuvaikutukset ja laaja-alaiset vaikutukset. Sen toiminnot veren lipidien alentamisessa, kasvainten vastaisessa, anti-inflammatorisessa, Parkinsonin taudin vastaisessa, ikääntymisen estämisessä jne. on validoitu alustavasti in vitro ja in vivo -kokeissa. PFC:n tutkimuksessa ihmisen immuunimodulaattorina on kuitenkin vielä aukko.

Dendriittisolut (DC:t) ovat tehokkaimpia erikoistuneita antigeeniä esitteleviä soluja ihmiskehossa. DC:iden määrä ihmiskehossa on äärimmäisen pieni, ja yleisesti käytetään sytokiinivälitteistä in vitro -induktiomallia, nimittäin ihmisen perifeerisen veren mononukleaarisista soluista peräisin olevia DC:itä (moDC:itä). In vitro -indusoitu DC-malli raportoitiin ensimmäisen kerran vuonna 1992, joka on perinteinen DC:iden viljelyjärjestelmä. Yleensä se vaatii viljelyn 6-7 päivää. Hiiren luuydinsoluja voidaan viljellä granulosyyttimakrofagipesäkkeitä stimuloivan tekijän (GM-CSF) ja interleukiinin (IL) -4 kanssa epäkypsien DC:iden (PBS-ryhmä) saamiseksi. Sytokiineja lisätään kypsinä ärsykkeinä ja viljellään 1-2 päivää kypsien DC:iden saamiseksi. Toisessa tutkimuksessa raportoitiin, että puhdistettuja ihmisen CD14+-soluja viljeltiin interferoni-β (IFN-β) tai IL-4:n kanssa 5 päivän ajan ja sitten viljeltiin tuumorinekroositekijä-a:n (TNF-a) kanssa 2 päivää korkean DC:n saamiseksi. CD11c:n ja CD83:n ilmentymistä, joilla on vahvempi kyky edistää allogeenisten CD4+T-solujen ja CD8+T-solujen proliferaatiota. Lukuisilla luonnollisista lähteistä peräisin olevilla polysakkarideilla on erinomaista immunomoduloivaa aktiivisuutta, kuten shiitake-sienistä, halkaistun kidussienistä, Yunzhi-sienistä ja Poria cocosista peräisin olevilla polysakkarideilla, joita on käytetty kliinisessä käytännössä. Ne voivat tehokkaasti parantaa kehon immuunitoimintaa, parantaa immuniteettia ja toimia apuhoitoina kasvainten vastaisessa hoidossa. PFC:stä ihmisen immuunivasteen modulaattorina on kuitenkin vähän tutkimusraportteja. Siksi tässä artikkelissa tehdään alustavaa tutkimusta PFC:n roolista ja siihen liittyvistä mekanismeista moDC:iden kypsymisen edistämisessä, jotta voidaan arvioida PFC:n potentiaalia luonnollisena immuunimodulaattorina.

DC:iden äärimmäisen pienestä osuudesta ihmisen kudoksissa ja korkean lajien välisen säilymisen vuoksi hiiren DC:iden ja ihmisen DC:iden välillä, jotta voidaan ratkaista alhaisen DC-tuotannon aiheuttamat tutkimusongelmat, ihmisen ääreisveren mononukleaarisoluista johdettujen DC:iden in vitro -induktiomallit on tutkittu, jotka voivat saada lyhyessä ajassa hyvän immunogeenisyyden omaavia DC:itä. Siksi tässä tutkimuksessa käytettiin perinteistä menetelmää ihmisen DC:iden indusoimiseksi in vitro: rhGM CSF:n ja rhIL-4:n yhteisviljelyä in vitro, väliaineen vaihtamista joka toinen päivä ja epäkypsien DC:iden saaminen 5. päivänä; Kuudentena päivänä lisättiin yhtä suuret tilavuudet PBS:ää, PFC:tä ja LPS:ää ryhmittelyn mukaisesti ja viljeltiin 24 tuntia viljelyprotokollana ihmisen ääreisveren mononukleaarisista soluista peräisin olevien DC:iden indusoimiseksi.

Luonnontuotteista johdettujen polysakkaridien etuna on alhainen toksisuus ja alhaiset kustannukset immunostimulantteina. Alustavien kokeiden jälkeen tutkimusryhmämme havaitsi, että PFC parantaa merkittävästi kypsää markkeria CD83 ihmisen ääreisveren mononukleaarisista soluista peräisin olevien DC-solujen pinnalla in vitro. Virtaussytometriatulokset osoittivat, että PFC-interventio pitoisuudella 10 μg/ml 24 tunnin ajan johti kypsän markkerin CD83 huippuekspressioon DC:iden pinnalla, mikä osoitti, että DC:t tulivat kypsiin tilaan. Siksi tutkimusryhmämme päätti in vitro -induktio- ja interventiosuunnitelman. CD83 on tärkeä kypsä biomarkkeri DC:iden pinnalla, kun taas CD86 toimii tärkeänä yhdessä stimuloivana molekyylinä DC:iden pinnalla, toimien toisena signaalina T-solujen aktivoimiseksi. Kahden biomarkkerin CD83 ja CD86 lisääntynyt ilmentyminen osoittaa, että PFC edistää ihmisen ääreisveren mononukleaarisista soluista peräisin olevien DC:iden kypsymistä, mikä viittaa siihen, että PFC voi samanaikaisesti lisätä sytokiinien eritystasoa DC:iden pinnalla. Siksi tässä tutkimuksessa arvioitiin DC:iden erittämien sytokiinien IL-6, TNF-a ja IL-10 tasot käyttämällä ELISA:ta. IL-10 liittyy läheisesti DC:iden immuunitoleranssiin, ja immuunisietokykyisiä DC:itä käytetään yleisesti kasvainten hoidossa, mikä tarjoaa mahdollisia terapeuttisia ideoita immuunitoleranssiin elinsiirroissa; 1L-6-perheellä on tärkeä rooli synnynnäisessä ja adaptiivisessa immuniteetissa, hematopoieesissa ja anti-inflammatorisissa vaikutuksissa; On olemassa tutkimuksia, jotka osoittavat, että IL-6 ja TGF-p osallistuvat yhdessä Th17-solujen erilaistumiseen; Kun virus tunkeutuu kehoon, DC:iden tuottama TNF-a vasteena viruksen aktivaatiolle toimii autokriinisenä kypsymistekijänä edistäen DC-kypsymistä. TNF-a:n estäminen saattaa DC:t epäkypsään vaiheeseen, mikä estää niitä suorittamasta täysin antigeenin esittelytoimintoaan. Tämän tutkimuksen ELISA-tiedot osoittivat, että IL-10:n eritystaso PFC-ryhmässä oli merkittävästi kohonnut verrattuna kahteen muuhun ryhmään, mikä osoittaa, että PFC parantaa DC:iden immuunitoleranssia; IL-6:n ja TNF-a:n lisääntyvät eritystasot viittaavat siihen, että PFC:llä voi olla DC:tä tehostava vaikutus T-solujen erilaistumisen edistämiseksi.