El polisacárido de Chlorella (PFC), como polisacárido natural, ha atraído mucha atención por parte de los académicos en los últimos años debido a sus ventajas de baja toxicidad, bajos efectos secundarios y efectos de amplio espectro. Sus funciones hipolipemiantes, antitumorales, antiinflamatorias, antiparkinsonianas, antienvejecimiento, etc. han sido validadas preliminarmente en experimentos in vitro e in vivo. Sin embargo, todavía existe un vacío en la investigación sobre el PFC como modulador inmunológico humano.

Las células dendríticas (CD) son las células presentadoras de antígenos especializadas más potentes del cuerpo humano. El número de CD en el cuerpo humano es extremadamente pequeño, y comúnmente se usa un modelo de inducción in vitro mediado por citocinas, a saber, CD derivadas de células mononucleares de sangre periférica humana (moDC). El modelo de CD inducida in vitro se informó por primera vez en 1992, que es el sistema de cultivo tradicional para las CD. Generalmente requiere cultivo durante 6-7 días. Las células de la médula ósea de ratón se pueden cultivar con factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF) e interleucina (IL) -4 para obtener CD inmaduras (grupo PBS). Las citoquinas se agregan como estímulos maduros y se cultivan durante 1 a 2 días para obtener CD maduras. Otro estudio informó que se cultivaron células CD14+ humanas purificadas con interferón-β (IFN-β) o IL-4 durante 5 días, y luego se cultivaron con factor de necrosis tumoral-a (TNF-a) durante 2 días para obtener CD con alta expresión de CD11c y CD83, que tienen una mayor capacidad para promover la proliferación de células T CD4+ y células T CD8+ alogénicas. Numerosos polisacáridos de fuentes naturales tienen una excelente actividad inmunomoduladora, como los polisacáridos de los hongos shiitake, los hongos de branquias abiertas, los hongos Yunzhi y la Poria cocos, que se han aplicado en la práctica clínica. Pueden mejorar eficazmente la función inmune del cuerpo, mejorar la inmunidad y servir como terapias adyuvantes para el tratamiento antitumoral. Sin embargo, existen pocos informes de investigación sobre el PFC como modulador inmunológico humano. Por lo tanto, este artículo lleva a cabo una investigación preliminar sobre el papel y los mecanismos relacionados del PFC en la promoción de la maduración de las moDC, con el fin de evaluar el potencial del PFC como modulador inmunológico natural.

Debido a la proporción extremadamente baja de CD en los tejidos humanos y la alta conservación entre especies entre las CD de ratón y las CD humanas, con el fin de resolver las dificultades de investigación causadas por la baja producción de CD, se utilizaron modelos de inducción in vitro de CD derivadas de células mononucleares de sangre periférica humana. Se han estudiado, que pueden obtener CD con buena inmunogenicidad en un corto período de tiempo. Por lo tanto, este estudio utilizó el método tradicional de inducción de CD humanas in vitro: cocultivo de rhGM CSF y rhIL-4 in vitro, cambiando el medio cada dos días y obteniendo CD inmaduras el quinto día; El sexto día, se agregaron volúmenes iguales de PBS, PFC y LPS según la agrupación y se cultivaron durante 24 horas como protocolo de cultivo para inducir CD derivadas de células mononucleares de sangre periférica humana.

Los polisacáridos derivados de productos naturales tienen las ventajas de una baja toxicidad y un bajo coste como inmunoestimulantes. Después de experimentos preliminares, nuestro grupo de investigación descubrió que PFC mejora significativamente el marcador maduro CD83 en la superficie de células DC derivadas de células mononucleares de sangre periférica humana inducidas in vitro. Los resultados de la citometría de flujo mostraron que la intervención de PFC a una concentración de 10 μg/ml durante 24 horas dio como resultado una expresión máxima del marcador maduro CD83 en la superficie de las CD, lo que indica que las CD entraron en un estado maduro. Por ello, nuestro grupo de investigación determinó el plan de inducción e intervención in vitro. CD83 es ​​un importante biomarcador maduro en la superficie de las CD, mientras que CD86 sirve como una importante molécula coestimuladora en la superficie de las CD, actuando como la segunda señal para activar las células T. La expresión mejorada de dos biomarcadores CD83 y CD86 indica que PFC promueve la maduración de las CD derivadas de células mononucleares de sangre periférica humana, lo que sugiere que la PFC puede aumentar simultáneamente el nivel de secreción de citocinas en la superficie de las CD. Por lo tanto, este estudio evaluó los niveles de citoquinas IL-6, TNF-a e IL-10 secretadas por las CD mediante ELISA. La IL-10 está estrechamente relacionada con la tolerancia inmune de las CD, y las CD con tolerancia inmune se usan comúnmente en el tratamiento de tumores, lo que proporciona ideas terapéuticas potenciales para la tolerancia inmune en el trasplante de órganos; La familia 1L-6 desempeña un papel importante en la inmunidad innata y adaptativa, la hematopoyesis y los efectos antiinflamatorios; Existen estudios que indican que la IL-6 y el TGF β participan conjuntamente en la diferenciación de las células Th17; Cuando el cuerpo es invadido por un virus, el TNF-a producido por las CD en respuesta a la activación del virus actúa como un factor de maduración autocrino para promover la maduración de las CD. El bloqueo del TNF-a pondrá a las CD en una etapa inmadura, impidiéndoles ejercer plenamente su función de presentación de antígenos. Los datos de ELISA en este estudio mostraron que el nivel de secreción de IL-10 en el grupo PFC aumentó significativamente en comparación con los otros dos grupos, lo que indica que PFC mejora la tolerancia inmune de las CD; Los crecientes niveles de secreción de IL-6 y TNF-a sugieren que la PFC puede tener el efecto de mejorar las CD para promover la diferenciación de las células T.