Polysaccharid fra Chlorella (PFC), som et naturligt polysaccharid, har tiltrukket sig meget opmærksomhed fra forskere i de senere år på grund af dets fordele med lav toksicitet, lave bivirkninger og bredspektrede effekter. Dets funktioner til at sænke blodlipider, anti-tumor, anti-inflammatorisk, anti Parkinsons, anti-aging osv. er blevet foreløbigt valideret in vitro og in vivo eksperimenter. Der er dog stadig et hul i forskningen om PFC som en human immunmodulator.

Dendritiske celler (DC'er) er de mest kraftfulde specialiserede antigen-præsenterende celler i den menneskelige krop. Antallet af DC'er i den menneskelige krop er ekstremt lille, og en cytokin-medieret in vitro-induktionsmodel, nemlig humant perifert blod mononukleære celle-afledte DC'er (moDC'er), er almindeligt anvendt. Den in vitro-inducerede DC-model blev først rapporteret i 1992, som er det traditionelle dyrkningssystem for DC'er. Generelt kræver det dyrkning i 6-7 dage. Museknoglemarvsceller kan dyrkes med granulocytmakrofagkolonistimulerende faktor (GM-CSF) og interleukin (IL) -4 for at opnå umodne DC'er (PBS-gruppe). Cytokiner tilsættes som modne stimuli og dyrkes i 1-2 dage for at opnå modne DC'er. En anden undersøgelse rapporterede, at oprensede humane CD14+-celler blev dyrket med interferon - β (IFN - β) eller IL-4 i 5 dage og derefter dyrket med tumornekrosefaktor-a (TNF-a) i 2 dage for at opnå DC'er med høj ekspression af CD11c og CD83, som har stærkere evne til at fremme spredningen af ​​allogene CD4+T-celler og CD8+T-celler. Talrige polysaccharider fra naturlige kilder har fremragende immunmodulerende aktivitet, såsom polysaccharider fra shiitake-svampe, spaltede gællesvampe, Yunzhi-svampe og Poria cocos, som er blevet anvendt i klinisk praksis. De kan effektivt forbedre kroppens immunfunktion, forbedre immuniteten og tjene som adjuverende terapier til antitumorbehandling. Der er dog få forskningsrapporter om PFC som en human immunmodulator. Derfor udfører denne artikel foreløbig forskning i PFC's rolle og relaterede mekanismer til at fremme modningen af ​​moDC'er for at evaluere potentialet af PFC som en naturlig immunmodulator.

På grund af den ekstremt lave andel af DC'er i humant væv og den høje interarts-bevarelse mellem muse DC'er og humane DC'er, for at løse forskningsproblemerne forårsaget af lav DC-produktion, in vitro-induktionsmodeller af DC'er afledt af humane perifere mononukleære blodceller er blevet undersøgt, som kan opnå DC'er med god immunogenicitet på kort tid. Derfor brugte denne undersøgelse den traditionelle metode til at inducere humane DC'er in vitro: co-dyrkning af rhGM CSF og rhIL-4 in vitro, ændring af mediet hver anden dag og opnåelse af umodne DC'er på den 5. dag; På den 6. dag blev lige store volumener af PBS, PFC og LPS tilsat i henhold til gruppering og dyrket i 24 timer som dyrkningsprotokollen til induktion af DC'er afledt af humane perifere mononukleære blodceller.

Polysaccharider afledt af naturlige produkter har fordelene ved lav toksicitet og lave omkostninger som immunstimulerende midler. Efter foreløbige eksperimenter fandt vores forskningsgruppe ud af, at PFC signifikant forbedrer den modne markør CD83 på overfladen af ​​humane perifere blod mononukleære celle-afledte DC-celler induceret in vitro. Flowcytometri-resultater viste, at PFC-intervention ved en koncentration på 10 μg/ml i 24 timer resulterede i en maksimal ekspression af den modne markør CD83 på overfladen af ​​DC'er, hvilket indikerer, at DC'er gik ind i en moden tilstand. Derfor fastlagde vores forskergruppe in vitro-induktions- og interventionsplanen. CD83 er en vigtig moden biomarkør på overfladen af ​​DC'er, mens CD86 fungerer som et vigtigt co-stimulerende molekyle på overfladen af ​​DC'er, der fungerer som det andet signal til aktivering af T-celler. Den forbedrede ekspression af to biomarkører CD83 og CD86 indikerer, at PFC fremmer modningen af ​​humane perifere blod mononukleære celle-afledte DC'er, hvilket tyder på, at PFC samtidigt kan øge sekretionsniveauet af cytokiner på overfladen af ​​DC'er. Derfor evaluerede denne undersøgelse niveauerne af cytokinerne IL-6, TNF-a og IL-10 udskilt af DC'er ved hjælp af ELISA. IL-10 er tæt beslægtet med DC'ers immuntolerance, og DC'er med immuntolerance er almindeligt anvendt i tumorbehandling, hvilket giver potentielle terapeutiske ideer til immuntolerance ved organtransplantation; 1L-6-familien spiller en vigtig rolle i medfødt og adaptiv immunitet, hæmatopoiese og anti-inflammatoriske virkninger; Der er undersøgelser, der indikerer, at IL-6 og TGF β i fællesskab deltager i differentieringen af ​​Th17-celler; Når kroppen invaderes af en virus, virker TNF-a produceret af DC'er som reaktion på virusaktivering som en autokrin modningsfaktor for at fremme DC-modning. Blokering af TNF-a vil sætte DC'er i et umodent stadium, hvilket forhindrer dem i fuldt ud at udøve deres antigenpræsentationsfunktion. ELISA-dataene i denne undersøgelse viste, at sekretionsniveauet af IL-10 i PFC-gruppen var signifikant øget sammenlignet med de to andre grupper, hvilket indikerer, at PFC øger immuntolerancen af ​​DC'er; De stigende sekretionsniveauer af IL-6 og TNF-a antyder, at PFC kan have den virkning at forstærke DC for at fremme T-celledifferentiering.