Polysacharid z Chlorelly (PFC), jako přírodní polysacharid, přitahuje v posledních letech velkou pozornost vědců pro své výhody nízké toxicity, nízkých vedlejších účinků a širokospektrálních účinků. Jeho funkce při snižování krevních lipidů, protinádorové, protizánětlivé, proti Parkinsonově chorobě, proti stárnutí atd. byly předběžně ověřeny in vitro a in vivo experimenty. Ve výzkumu PFC jako lidského imunitního modulátoru však stále existuje mezera.

Dendritické buňky (DC) jsou nejsilnější specializované buňky prezentující antigen v lidském těle. Počet DC v lidském těle je extrémně malý a běžně se používá in vitro model indukce zprostředkovaný cytokiny, jmenovitě DC derivované z lidských periferních krevních mononukleárních buněk (moDCs). Model in vitro indukovaných DC byl poprvé popsán v roce 1992, což je tradiční kultivační systém pro DC. Obecně vyžaduje kultivaci po dobu 6-7 dnů. Buňky kostní dřeně myší mohou být kultivovány s faktorem stimulujícím kolonie granulocytů a makrofágů (GM-CSF) a interleukinem (IL)-4 za účelem získání nezralých DC (skupina PBS). Cytokiny se přidávají jako zralé stimuly a kultivují se 1-2 dny, aby se získaly zralé DC. Další studie uvádí, že purifikované lidské CD14+ buňky byly kultivovány s interferonem – β (IFN – β) nebo IL-4 po dobu 5 dnů a poté kultivovány s tumor nekrotizujícím faktorem-a (TNF-a) po dobu 2 dnů, aby se získaly DC s vysokým exprese CD11c a CD83, které mají silnější schopnost podporovat proliferaci alogenních CD4+T buněk a CD8+T buněk. Četné polysacharidy z přírodních zdrojů mají vynikající imunomodulační aktivitu, např. polysacharidy z hub shiitake, žaberní houby, houby Yunzhi a kokosové ořechy, které byly aplikovány v klinické praxi. Mohou účinně zlepšit imunitní funkce těla, posílit imunitu a sloužit jako adjuvantní terapie při protinádorové léčbě. Existuje však jen málo výzkumných zpráv o PFC jako lidském imunitním modulátoru. Proto tento článek provádí předběžný výzkum úlohy a souvisejících mechanismů PFC při podpoře zrání moDC, aby se vyhodnotil potenciál PFC jako přirozeného imunitního modulátoru.

Kvůli extrémně nízkému podílu DC v lidských tkáních a vysoké mezidruhové konzervaci mezi myšími DC a lidskými DC, aby se vyřešily výzkumné obtíže způsobené nízkou produkcí DC, byly in vitro indukční modely DC odvozené z lidských mononukleárních buněk periferní krve. byly studovány, které mohou získat DC s dobrou imunogenicitou v krátkém časovém období. Proto tato studie použila tradiční metodu indukce lidských DC in vitro: společná kultivace rhGM CSF a rhIL-4 in vitro, výměna média každý druhý den a získání nezralých DC 5. den; Šestého dne byly přidány stejné objemy PBS, PFC a LPS podle seskupení a kultivovány po dobu 24 hodin jako kultivační protokol pro indukci DC pocházejících z lidských mononukleárních buněk periferní krve.

Polysacharidy odvozené z přírodních produktů mají jako imunostimulanty výhody nízké toxicity a nízké ceny. Po předběžných experimentech naše výzkumná skupina zjistila, že PFC významně zvyšuje zralý marker CD83 na povrchu lidských DC buněk derivovaných z mononukleárních buněk periferní krve indukovaných in vitro. Výsledky průtokové cytometrie ukázaly, že zásah PFC v koncentraci 10 μg/ml po dobu 24 hodin vedl k maximální expresi zralého markeru CD83 na povrchu DC, což ukazuje, že DC vstoupily do zralého stavu. Naše výzkumná skupina proto stanovila in vitro plán indukce a intervence. CD83 je důležitý zralý biomarker na povrchu DC, zatímco CD86 slouží jako důležitá kostimulační molekula na povrchu DC, která působí jako druhý signál pro aktivaci T buněk. Zvýšená exprese dvou biomarkerů CD83 a CD86 ukazuje, že PFC podporuje zrání DC derivovaných z lidských periferních mononukleárních buněk, což naznačuje, že PFC může současně zvyšovat hladinu sekrece cytokinů na povrchu DC. Proto tato studie hodnotila hladiny cytokinů IL-6, TNF-a a IL-10 vylučovaných DC pomocí ELISA. IL-10 úzce souvisí s imunitní tolerancí DC a DC s imunitní tolerancí se běžně používají při léčbě nádorů, což poskytuje potenciální terapeutické nápady pro imunitní toleranci při transplantaci orgánů; Rodina 1L-6 hraje důležitou roli ve vrozené a adaptivní imunitě, hematopoéze a protizánětlivých účincích; Existují studie naznačující, že IL-6 a TGF β se společně účastní diferenciace Th17 buněk; Když je tělo napadeno virem, TNF-a produkovaný DC v reakci na aktivaci viru působí jako autokrinní maturační faktor, který podporuje zrání DC. Blokování TNF-a uvede DC do nezralého stadia, což jim zabrání plně uplatňovat jejich funkci prezentace antigenu. Data ELISA v této studii ukázala, že hladina sekrece IL-10 ve skupině PFC byla významně zvýšena ve srovnání s dalšími dvěma skupinami, což ukazuje, že PFC zvyšuje imunitní toleranci DC; Zvyšující se hladiny sekrece IL-6 a TNF-a naznačují, že PFC může mít vliv na zvýšení DC pro podporu diferenciace T buněk.