El polisacàrid de Chlorella (PFC), com a polisacàrid natural, ha cridat molt l'atenció dels estudiosos en els últims anys a causa dels seus avantatges de baixa toxicitat, efectes secundaris baixos i efectes d'ampli espectre. Les seves funcions en la reducció de lípids sanguinis, antitumorals, antiinflamatoris, anti Parkinson, antienvelliment, etc., han estat validades preliminarment amb experiments in vitro i in vivo. Tanmateix, encara hi ha un buit en la investigació sobre PFC com a modulador immune humà.

Les cèl·lules dendrítiques (DC) són les cèl·lules especialitzades que presenten antígens més potents del cos humà. El nombre de DC al cos humà és extremadament petit i s'utilitza habitualment un model d'inducció in vitro mediat per citocines, és a dir, DC derivats de cèl·lules mononuclears de sang perifèrica humana (moDC). El model de DC induït in vitro es va informar per primera vegada el 1992, que és el sistema de cultiu tradicional per a DC. En general, requereix conreu durant 6-7 dies. Les cèl·lules de medul·la òssia del ratolí es poden cultivar amb factor estimulant de colònies de macròfags granulòcits (GM-CSF) i interleucina (IL) -4 per obtenir DC immadurs (grup PBS). Les citocines s'afegeixen com a estímuls madurs i es cultiven durant 1-2 dies per obtenir DC madures. Un altre estudi va informar que les cèl·lules CD14+ humanes purificades es van cultivar amb interferó - β (IFN - β) o IL-4 durant 5 dies i després es van cultivar amb factor de necrosi tumoral-a (TNF-a) durant 2 dies per obtenir DC amb alt nivell. expressió de CD11c i CD83, que tenen una capacitat més forta per promoure la proliferació de cèl·lules T CD4+ al·logèniques i cèl·lules T CD8+. Nombrosos polisacàrids de fonts naturals tenen una excel·lent activitat immunomoduladora, com els polisacàrids de bolets shiitake, bolets de branquia dividida, bolets Yunzhi i cocos Poria, que s'han aplicat en la pràctica clínica. Poden millorar eficaçment la funció immune del cos, millorar la immunitat i servir com a teràpies adjuvants per al tractament antitumoral. Tanmateix, hi ha pocs informes d'investigació sobre PFC com a modulador immune humà. Per tant, aquest article porta a terme una investigació preliminar sobre el paper i els mecanismes relacionats de la PFC en la promoció de la maduració de moDC, per tal d'avaluar el potencial de la PFC com a modulador immune natural.

A causa de la proporció extremadament baixa de DC en teixits humans i l'alta conservació interespècies entre DC de ratolí i DC humans, per resoldre les dificultats de recerca causades per la baixa producció de DC, models d'inducció in vitro de DC derivats de cèl·lules mononuclears de sang perifèrica humana. s'han estudiat, que poden obtenir DC amb bona immunogenicitat en un curt període de temps. Per tant, aquest estudi va utilitzar el mètode tradicional d'inducció de DC humans in vitro: co-cultiu de rhGM CSF i rhIL-4 in vitro, canviant el medi cada dos dies i obtenint DC immadurs el 5è dia; El sisè dia, es van afegir volums iguals de PBS, PFC i LPS segons l'agrupació i es van cultivar durant 24 hores com a protocol de cultiu per induir DC derivats de cèl·lules mononuclears de sang perifèrica humana.

Els polisacàrids derivats de productes naturals tenen els avantatges d'una baixa toxicitat i un baix cost com a immunoestimulants. Després d'experiments preliminars, el nostre grup de recerca va trobar que el PFC millora significativament el marcador madur CD83 a la superfície de les cèl·lules DC derivades de cèl·lules mononuclears de sang perifèrica humana induïdes in vitro. Els resultats de la citometria de flux van mostrar que la intervenció de PFC a una concentració de 10 μ g/mL durant 24 hores va donar lloc a una expressió màxima del marcador madur CD83 a la superfície dels DC, cosa que indica que els DC van entrar en un estat madur. Per tant, el nostre grup de recerca va determinar el pla d'inducció i intervenció in vitro. El CD83 és un biomarcador madur important a la superfície dels DC, mentre que el CD86 serveix com a molècula coestimuladora important a la superfície dels DC, actuant com a segon senyal per activar les cèl·lules T. L'expressió millorada de dos biomarcadors CD83 i CD86 indica que la PFC promou la maduració de les DC derivades de cèl·lules mononuclears de sang perifèrica humana, cosa que suggereix que la PFC pot augmentar simultàniament el nivell de secreció de citocines a la superfície de les DC. Per tant, aquest estudi va avaluar els nivells de citocines IL-6, TNF-a i IL-10 secretades pels DC mitjançant ELISA. IL-10 està estretament relacionada amb la tolerància immune de les DC, i les DC amb tolerància immune s'utilitzen habitualment en el tractament del tumor, proporcionant idees terapèutiques potencials per a la tolerància immune en el trasplantament d'òrgans; La família 1L-6 té un paper important en la immunitat innata i adaptativa, l'hematopoesi i els efectes antiinflamatoris; Hi ha estudis que indiquen que IL-6 i TGF β participen conjuntament en la diferenciació de cèl·lules Th17; Quan el cos és envaït per un virus, el TNF-a produït pels DC en resposta a l'activació del virus actua com un factor de maduració autocrí per promoure la maduració de DC. El bloqueig del TNF-a posarà els DC en una fase immadura, impedint-los que exerceixin plenament la seva funció de presentació d'antigen. Les dades d'ELISA d'aquest estudi van mostrar que el nivell de secreció d'IL-10 al grup PFC va augmentar significativament en comparació amb els altres dos grups, cosa que indica que PFC millora la tolerància immune dels DC; Els nivells de secreció creixents d'IL-6 i TNF-a suggereixen que la PFC pot tenir l'efecte de millorar les DC per promoure la diferenciació de cèl·lules T.