Polisaharid iz Chlorella (PFC), kao prirodni polisaharid, privukao je veliku pažnju naučnika posljednjih godina zbog svojih prednosti niske toksičnosti, niskih nuspojava i efekata širokog spektra. Njegove funkcije u snižavanju lipida u krvi, antitumorski, protuupalni, antiparkinsonovi, anti-aging itd. su preliminarno potvrđene in vitro i in vivo eksperimentima. Međutim, još uvijek postoji praznina u istraživanju PFC-a kao ljudskog imunomodulatora.

Dendritske ćelije (DC) su najmoćnije specijalizovane ćelije koje predstavljaju antigen u ljudskom telu. Broj DC-a u ljudskom tijelu je izuzetno mali, a in vitro indukcioni model posredovan citokinom, odnosno DC-i izvedeni iz mononuklearnih ćelija ljudske periferne krvi (moDC), se obično koristi. In vitro indukovani DC model je prvi put objavljen 1992. godine, što je tradicionalni sistem kulture za DC. Generalno, zahteva uzgoj 6-7 dana. Ćelije koštane srži miša mogu se uzgajati sa faktorom stimulacije kolonije makrofaga granulocita (GM-CSF) i interleukinom (IL) -4 kako bi se dobili nezreli DC (PBS grupa). Citokini se dodaju kao zreli stimulansi i uzgajaju 1-2 dana da bi se dobili zreli DC. Druga studija je objavila da su pročišćene ljudske CD14+ ćelije uzgajane sa interferonom – β (IFN – β) ili IL-4 5 dana, a zatim kultivisane sa faktorom nekroze tumora-a (TNF-a) tokom 2 dana kako bi se dobili DC sa visokim ekspresija CD11c i CD83, koji imaju jaču sposobnost da promovišu proliferaciju alogenih CD4+T ćelija i CD8+T ćelija. Brojni polisaharidi iz prirodnih izvora imaju odličnu imunomodulatornu aktivnost, kao što su polisaharidi iz šitake gljiva, gljiva split gill, pečuraka Yunzhi i Poria kokosa, koji se primjenjuju u kliničkoj praksi. Oni mogu efikasno poboljšati imunološku funkciju tijela, poboljšati imunitet i poslužiti kao pomoćna terapija za liječenje tumora. Međutim, postoji nekoliko istraživačkih izvještaja o PFC-u kao ljudskom imunomodulatoru. Stoga, ovaj članak provodi preliminarno istraživanje o ulozi i povezanim mehanizmima PFC-a u promoviranju sazrijevanja moDC-a, kako bi se procijenio potencijal PFC-a kao prirodnog imunomodulatora.

Zbog izuzetno niskog udjela DC-a u ljudskim tkivima i visoke očuvanosti među vrstama između mišjih DC-a i ljudskih DC-a, kako bi se riješile istraživačke poteškoće uzrokovane niskom proizvodnjom DC-a, in vitro indukcioni modeli DC-a izvedeni iz mononuklearnih stanica periferne krvi čovjeka su proučavani, koji mogu dobiti DC sa dobrom imunogenošću u kratkom vremenskom periodu. Stoga je ova studija koristila tradicionalnu metodu indukcije humanih DC in vitro: kokultiviranje rhGM CSF i rhIL-4 in vitro, mijenjanje podloge svaki drugi dan i dobijanje nezrelih DC 5. dana; Šestog dana dodane su jednake količine PBS, PFC i LPS prema grupisanju i kultivisane 24 sata kao protokol kulture za indukciju DC-ova izvedenih iz mononuklearnih ćelija ljudske periferne krvi.

Polisaharidi dobiveni iz prirodnih proizvoda imaju prednosti niske toksičnosti i niske cijene kao imunostimulansi. Nakon preliminarnih eksperimenata, naša istraživačka grupa je otkrila da PFC značajno pojačava zreli marker CD83 na površini DC ćelija izvedene iz mononuklearnih ćelija ljudske periferne krvi inducirane in vitro. Rezultati protočne citometrije su pokazali da je intervencija PFC u koncentraciji od 10 μg/mL tokom 24 sata rezultirala vršnom ekspresijom zrelog markera CD83 na površini DC, što ukazuje da su DC ušli u zrelo stanje. Stoga je naša istraživačka grupa utvrdila in vitro plan indukcije i intervencije. CD83 je važan zreli biomarker na površini DC-a, dok CD86 služi kao važan kostimulacijski molekul na površini DC-a, djelujući kao drugi signal za aktivaciju T-ćelija. Povećana ekspresija dva biomarkera CD83 i CD86 ukazuje na to da PFC potiče sazrijevanje DC-a izvedenih iz mononuklearnih ćelija ljudske periferne krvi, sugerirajući da PFC može istovremeno povećati razinu sekrecije citokina na površini DC-a. Stoga je ova studija procijenila nivoe citokina IL-6, TNF-a i IL-10 koje luče DC koristeći ELISA. IL-10 je usko povezan sa imunološkom tolerancijom DC-a, a DC-ovi sa imunološkom tolerancijom se obično koriste u liječenju tumora, pružajući potencijalne terapeutske ideje za imunološku toleranciju u transplantaciji organa; Porodica 1L-6 igra važnu ulogu u urođenom i adaptivnom imunitetu, hematopoezi i antiinflamatornim efektima; Postoje studije koje ukazuju da IL-6 i TGF β zajednički učestvuju u diferencijaciji Th17 ćelija; Kada je tijelo napadnuto virusom, TNF-a koji proizvode DC kao odgovor na aktivaciju virusa djeluje kao autokrini faktor sazrijevanja koji potiče sazrijevanje DC. Blokiranje TNF-a će dovesti DC u nezrelu fazu, sprečavajući ih da u potpunosti ispolje svoju funkciju prezentacije antigena. ELISA podaci u ovoj studiji pokazali su da je nivo sekrecije IL-10 u PFC grupi značajno povećan u poređenju sa druge dvije grupe, što ukazuje da PFC povećava imunološku toleranciju DC; Povećani nivoi sekrecije IL-6 i TNF-a sugeriraju da PFC može imati učinak povećanja DC-a kako bi promovirao diferencijaciju T stanica.