Поліцукрыд з хларэлы (PFC), як прыродны поліцукрыд, прыцягнуў вялікую ўвагу навукоўцаў у апошнія гады з-за яго пераваг нізкай таксічнасці, нізкіх пабочных эфектаў і шырокага спектру дзеяння. Яго функцыі па зніжэнні ўзроўню ліпідаў у крыві, проціпухлінным, супрацьзапаленчым, барацьбе з Паркінсанам, старэнні і г.д. былі папярэдне пацверджаны ў эксперыментах in vitro і in vivo. Аднак да гэтага часу існуе прабел у даследаваннях ПФК як імунамадулятара чалавека.

微信截图_20241104133550

Дендрітные клеткі (ДК) з'яўляюцца найбольш магутнымі спецыялізаванымі антыген-прадстаўляючымі клеткамі ў арганізме чалавека. Колькасць ДК у арганізме чалавека надзвычай малая, і звычайна выкарыстоўваецца мадэль індукцыі in vitro, апасродкаваная цітокінамі, а менавіта ДК, атрыманыя з монануклеарных клетак перыферычнай крыві чалавека (moDC). Упершыню ў 1992 годзе была апублікавана мадэль індукаванага пастаяннага току in vitro, якая з'яўляецца традыцыйнай сістэмай культуры для DC. Як правіла, патрабуецца вырошчванне на працягу 6-7 дзён. Клеткі касцявога мозгу мышэй можна культываваць з гранулоцитарно-макрафагальнага колониестимулирующим фактарам (GM-CSF) і інтэрлейкіны (IL) -4 для атрымання няспелых ДК (група PBS). Цітокіны дадаюць у якасці спелых стымулаў і культывуюць на працягу 1-2 дзён для атрымання спелых DC. Іншае даследаванне паказала, што вычышчаныя клеткі CD14+ чалавека культывавалі з інтэрферонам - β (IFN - β) або IL-4 на працягу 5 дзён, а затым культывавалі з фактарам некрозу пухліны (TNF-a) на працягу 2 дзён, каб атрымаць ДК з высокім экспрэсія CD11c і CD83, якія валодаюць большай здольнасцю спрыяць праліферацыі алагенных CD4+T-клетак і CD8+T-клетак. Шматлікія поліцукрыды з прыродных крыніц валодаюць выдатнай імунамадулюючыя актыўнасцю, такія як поліцукрыды з грыбоў шыітаке, жаберных грыбоў, грыбоў Юньчжы і какосавых порыя, якія прымяняюцца ў клінічнай практыцы. Яны могуць эфектыўна палепшыць імунную функцыю арганізма, павысіць імунітэт і служыць у якасці дапаможнай тэрапіі для проціпухліннага лячэння. Тым не менш, ёсць некалькі справаздач аб даследаваннях ПФК як імунамадулятара чалавека. Такім чынам, у гэтым артыкуле праводзіцца папярэдняе даследаванне ролі і звязаных з ёй механізмаў ПФК у садзейнічанні паспяванню моДК, каб ацаніць патэнцыял ПФК як натуральнага імунамадулятара.

З-за надзвычай нізкай долі ДК у тканінах чалавека і высокай міжвідавай кансервацыі паміж ДК мышы і ДК чалавека, для таго, каб вырашыць цяжкасці даследавання, выкліканыя нізкай прадукцыяй ДК, былі створаны in vitro мадэлі індукцыі ДК, атрыманых з монануклеарных клетак перыферычнай крыві чалавека былі вывучаны, якія могуць атрымаць ДК з добрай імунагеннасці за кароткі прамежак часу. Такім чынам, у гэтым даследаванні выкарыстоўваўся традыцыйны метад індукцыі ДК чалавека in vitro: сумеснае культываванне rhGM CSF і rhIL-4 in vitro, змена асяроддзя праз дзень і атрыманне няспелых ДК на 5-ы дзень; На 6-ы дзень роўныя аб'ёмы PBS, PFC і LPS былі дададзены ў адпаведнасці з групоўкай і культываваліся на працягу 24 гадзін у якасці пратакола культывавання для індукцыі DC, атрыманых з монануклеараў перыферычнай крыві чалавека.

 

Поліцукрыды, атрыманыя з натуральных прадуктаў, валодаюць перавагамі нізкай таксічнасці і нізкай кошту ў якасці імунастымулятары. Пасля папярэдніх эксперыментаў наша даследчая група выявіла, што PFC значна ўзмацняе спелы маркер CD83 на паверхні мононуклеарных клетак перыферычнай крыві чалавека DC, індукаваных in vitro. Вынікі праточнай цытаметрыі паказалі, што ўмяшанне PFC пры канцэнтрацыі 10 мкг/мл на працягу 24 гадзін прывяло да пікавай экспрэсіі спелага маркера CD83 на паверхні DC, што паказвае на тое, што DC перайшлі ў сталы стан. Такім чынам, наша даследчая група вызначыла план індукцыі in vitro і ўмяшання. CD83 з'яўляецца важным спелым біямаркерам на паверхні DC, у той час як CD86 служыць важнай сумеснай стымулюючай малекулай на паверхні DC, дзейнічаючы як другі сігнал для актывацыі Т-клетак. Узмоцненая экспрэсія двух біямаркераў CD83 і CD86 паказвае на тое, што PFC спрыяе паспяванню DC, атрыманых з монануклеарных клетак перыферычнай крыві чалавека, мяркуючы, што PFC можа адначасова павышаць узровень сакрэцыі цітокіны на паверхні DC. Такім чынам, гэта даследаванне ацэньвала ўзроўні цітокіны IL-6, TNF-a і IL-10, якія вылучаюцца DC з дапамогай ELISA. ІЛ-10 цесна звязаны з імуннай талерантнасцю да ДК, і ДК з імуннай талерантнасцю звычайна выкарыстоўваюцца пры лячэнні пухлін, забяспечваючы патэнцыйныя тэрапеўтычныя ідэі для імуннай талерантнасці пры трансплантацыі органаў; Сямейства 1L-6 гуляе важную ролю ў прыроджаным і адаптыўным імунітэце, крыватворы і супрацьзапаленчых эфектах; Ёсць даследаванні, якія паказваюць, што IL-6 і TGF β сумесна ўдзельнічаюць у дыферэнцыявання клетак Th17; Калі ў арганізм уварваецца вірус, TNF-a, які выпрацоўваецца DC у адказ на актывацыю віруса, дзейнічае як аўтакрынны фактар ​​паспявання, спрыяючы паспяванню DC. Блакаванне TNF-a перавядзе DC у няспелую стадыю, не даючы ім цалкам ажыццявіць сваю функцыю прэзентацыі антыгена. Дадзеныя ELISA ў гэтым даследаванні паказалі, што ўзровень сакрэцыі IL-10 у групе PFC быў значна павышаны ў параўнанні з двума іншымі групамі, што паказвае на тое, што PFC павышае імунную талерантнасць да DC; Павелічэнне ўзроўню сакрэцыі IL-6 і TNF-a сведчыць аб тым, што PFC можа мець эфект узмацнення DC для садзейнічання дыферэнцыявання Т-клетак.

 

 


Час публікацыі: 31 кастрычніка 2024 г